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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察降鈣素在椎間盤退變過(guò)程中的作用,探討降鈣素的作用機(jī)制,為保守治療椎間盤退變提供理論依據(jù)。
方法:
1.實(shí)驗(yàn)處理
新西蘭大白兔60只,制備動(dòng)物模型,隨機(jī)抽取10.只,術(shù)前術(shù)后2周,4周后MRI檢查,觀察兔子椎間盤的高度,與術(shù)前對(duì)比,觀察椎間隙的變化。取每組椎間盤髓核組織,無(wú)菌生理鹽水沖洗,以體積分?jǐn)?shù)10%甲醛溶液固定24小時(shí),石蠟包埋,行常規(guī)切片蘇木精-伊紅染色,觀察髓核
2、組織形態(tài)學(xué)變化。確定模型制備成功。然后50只隨機(jī)分成10組,(B1C1D1E1F1,B2C2D2E2F2)B1B2組作為對(duì)照組注射生理鹽水,分別于1個(gè)月、2個(gè)月取材。CDEF4組分別注射降鈣素1IU/Kg,2IU/Kg,4IU/Kg,8IU/Kg,C1D1E1F1組1個(gè)月取材,C2D2E2F2組2個(gè)月取材。(取材前所有新西蘭大白兔都行MRI檢查)
2.觀察指標(biāo)
2.1每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物預(yù)定時(shí)間處死,行MRI檢測(cè),觀
3、察椎間盤高度
2.2處死后取材,無(wú)菌生理鹽水沖洗,以體積分?jǐn)?shù)10%甲醛溶液固定24小時(shí),石蠟包埋,行常規(guī)切片蘇木精-伊紅染色,觀察髓核組織形態(tài)學(xué)變化,觀察番紅染色標(biāo)本髓核中蛋白多糖的表達(dá)數(shù)量變化,免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)椎間盤軟骨板內(nèi)細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)情況,計(jì)算陽(yáng)性表達(dá)率。
3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。計(jì)量數(shù)據(jù)均用x±S表示,組間比較行
4、t檢驗(yàn),重復(fù)測(cè)量檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
結(jié)果:
1.應(yīng)用降鈣素預(yù)防或阻止椎間盤退變,應(yīng)用降鈣素組椎間盤退變緩慢于生理鹽水組,兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
2.應(yīng)用2個(gè)月降鈣素組優(yōu)于1個(gè)月降鈣素組。有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.1個(gè)月的8IU/Kg組和2個(gè)月的4IU/Kg組差異不大,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4.2個(gè)月的4IU/Kg組和8IU/Kg組差異不大,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。<
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