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1、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma,RB)是嬰幼兒最常見(jiàn)的眼內(nèi)惡性腫瘤,目前國(guó)際上針對(duì)RB開(kāi)展了以化療為主結(jié)合局部治療的綜合療法,極大改善了患兒的生命預(yù)后,然而化療存在最大的問(wèn)題就是腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移1。腫瘤化療失敗后復(fù)發(fā)的主要原因是腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性,而耐藥性的產(chǎn)生機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜,主要包括多耐藥性蛋白的功能表達(dá)、靜息期細(xì)胞對(duì)化療不敏感以及腫瘤細(xì)胞凋亡耐受等2-4,雖然在這些方面的研取得了一定的進(jìn)展,但在闡釋耐藥性機(jī)制及
2、指導(dǎo)臨床應(yīng)用上并未取得根本性突破。
腫瘤干細(xì)胞(Cancer stem cells,CSCs)是一類(lèi)極少的具有自我更新、不定潛能性并促使腫瘤形成的細(xì)胞,對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)、形成及轉(zhuǎn)移起到關(guān)鍵作用5,更為重要的是這部分腫瘤起始性細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性較其它非致瘤性腫瘤細(xì)胞明顯降低。目前,臨床上化療很大程度上是針對(duì)大的非致瘤性腫瘤細(xì)胞組成的腫瘤塊,而不能有效殺滅或抑制腫瘤干細(xì)胞,導(dǎo)致了化療后腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移6-8。雖然不是所有惡性腫瘤的
3、生物學(xué)特點(diǎn)都符合腫瘤干細(xì)胞理論,但CSCs假說(shuō)為理解RB化療耐藥性提出一種更為合理的細(xì)胞水平的理論解釋。通過(guò)研究腫瘤干細(xì)胞,將有利于進(jìn)一步理解RB發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的機(jī)制,可能為減少RB化療后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移提供新的治療策略。目前在多種實(shí)體瘤中均已證實(shí)有腫瘤干細(xì)胞存在,包括乳腺癌9、腦腫瘤10,11、胰腺癌12、結(jié)腸癌13、黑色素瘤14、前列腺癌7和卵巢癌6等。然而和其他腫瘤研究相比,作為眼內(nèi)腫瘤的RB由于新鮮標(biāo)本獲取的困難性以及樣本的變異性使
4、得其腫瘤干細(xì)胞的研究相對(duì)滯后。
本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)人RB腫瘤細(xì)胞體外采用無(wú)血清限定培養(yǎng)基長(zhǎng)期培養(yǎng),分離得到了以腫瘤球方式生長(zhǎng)的細(xì)胞系,并可以在連續(xù)傳代的同時(shí)保持了其自我更新、增殖及分化能力,同時(shí)通過(guò)化療耐藥性試驗(yàn)及小鼠致瘤試驗(yàn)評(píng)價(jià)其對(duì)化療藥物的反應(yīng)性及異體致瘤能力。同時(shí)文章第三部分還測(cè)定了表面標(biāo)志物ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member2,ATP結(jié)合膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2)、CD133和
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