TWEAK及其受體Fnl4在酒精中毒性肌損傷中的表達.pdf

1、慢性酒精中毒性肌?。–hronic alcoholic myopathy，CAM）是由于長期酗酒引起的一種肌肉病，在嗜酒者中發(fā)病率約40%-60%，臨床表現(xiàn)為肌無力、肌痛、肌萎縮和行走困難，嚴重影響患者的生活質量。CAM的特點是選擇性侵犯Ⅱ型肌纖維，而Ⅰ型肌纖維相對不受累。作為可治療干預的肌病，研究其發(fā)病機制，具有十分重要的臨床意義。Fernández-SolàJ已證實：細胞凋亡存在于CAM骨骼肌中，但其致病機制不清。 腫瘤壞死

2、因子樣凋亡微弱誘導劑（TNF-likeweak inducer of apoptosis，TWEAK）是腫瘤壞死因子（TNF）配體超家族的成員，TWEAK轉錄子足量表達于人體多種組織，是一種廣泛表達的TNF家族配基。通過與受體特異性結合，如成纖維細胞生長因子誘導的早期反應蛋白14（Fn14）等，傳遞死亡信號，誘導細胞的凋亡、激活NF-κB信號傳導通路，維持免疫系統(tǒng)的穩(wěn)定性等方面具有關鍵性的作用。 因此我們推測TWEAK可能通過與

3、其受體Fn14結合，誘導細胞凋亡，參與CAM的發(fā)生發(fā)展過程． 目的：本實驗檢測大鼠酒精中毒性骨骼肌損傷中TWEAK和Fn14的體內外表達，探討TWEAK/Fn14與酒精中毒性骨骼肌損傷發(fā)病過程的相關性。 方法： 1．大鼠骨骼肌酒精中毒性肌病模型制備與原代細胞培養(yǎng)。 2．采用熒光實時定量逆轉錄一聚合酶鏈反應（real-time fluorescence quantitative PCR）和免疫組化、West

4、ernBlot方法檢測大鼠酒精損傷跖肌中TWEAK和Fn-14的mRNA和蛋白的表達。 結果： 1．動物模型建立：實驗組大鼠精神狀態(tài)差，活動減少，皮毛無光澤（簡單寫出具體行為特點），骨骼肌纖維排列松散，明顯萎縮。實驗組原代細胞大小不等，形態(tài)不規(guī)則。倒置顯微鏡下均可觀察到骨骼肌細胞呈梭型，有細胞融合現(xiàn)象和自主收縮。 2．TWEAK與Fn14在體內與體外實驗組跖肌中均表達升高（P<0．05）。腓腸肌與比目魚肌體內外T

5、WEAK與Fn14表達無顯著性差異，（P>0．05）。 3．實驗組TWEAK與Fn14體外mRNA水平上調高于體內（P<0．05）；實驗組Fn14在體外的蛋白表達上調高于體內（P<0．05），TWEAK蛋白表達體內外無顯著性差異（P>0．05）。腓腸肌與比目魚肌體內外TWEAK與Fn14表達均無顯著性差異，（P>0．05）。 結論： 1．實驗組TWEAK及其受體Fn14的高表達與酒精攝入具有相關性。提示可誘導骨骼