MMP2在人腦膠質(zhì)瘤中的表達及姜黃素對膠質(zhì)瘤細胞和HUVEC生物學(xué)特性的影響.pdf

1、膠質(zhì)瘤是最常見的原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤，傳統(tǒng)治療手段不能將其治愈，總的來說患者療效不理想。因而深入研究膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的細胞及分子機制具有重大現(xiàn)實意義。血管新生是生理性及病理性血管生成的主要形式，研究發(fā)現(xiàn)實體性腫瘤的生長高度依賴于血管的新生。絕大部分腦膠質(zhì)瘤屬于實體性腫瘤，研究表明它亦具有高度血管化的的特征，它通過獲得新生血管供應(yīng)的O2及營養(yǎng)物質(zhì)，不斷生長增殖并向周圍組織侵襲。因此，抗血管生成是治療膠質(zhì)瘤極具希望的策略之一，但其血管新生的調(diào)節(jié)機制

2、目前尚不清楚，尋找和識別在血管生成過程中的調(diào)控因子將是抗膠質(zhì)瘤血管生成的有效途徑，具有重要意義。 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP2)是蛋白水解酶家族的成員之一，MMP2以無活性酶原的形式由多種細胞(成纖維細胞、巨噬細胞、內(nèi)皮細胞和惡性腫瘤細胞等)分泌，在激活劑的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓拿?。MMP2不僅可以降解細胞外基質(zhì)，使細胞間質(zhì)的空隙增大，為腫瘤血管的形成提供有利的空間，還可以增強內(nèi)皮細胞移動的能力，通過提高促血管生成因子間接參與血管的

3、形成，以及作為促進血管形成的因子直接參與新生血管的形成。MMP2將有望成為抗血管生成治療的靶點。目前已經(jīng)有一些關(guān)于各種腫瘤MMP2表達的報道，人腦膠質(zhì)瘤中也有報道表達，但其與膠質(zhì)瘤病理性血管的關(guān)系，目前國內(nèi)外無相關(guān)研究報道。 姜黃素是姜黃中提取的一種植物多酚，也是姜黃發(fā)揮藥理作用最重要的活性成分。近年的研究不僅證明了姜黃的傳統(tǒng)作用，如抗炎、抗氧化、清除氧自由基、抗人類免疫缺陷病毒、保護肝臟和腎臟、抗纖維化等；而且還揭示出一些新的

4、藥理作用，如防癌抗癌、抗血管生成等作用。 目的：探討MMP2在人腦膠質(zhì)瘤組織和細胞中的表達情況；探討姜黃素對膠質(zhì)瘤細胞MMP2表達和對膠質(zhì)瘤細胞、HUVEC生物學(xué)特性的影響。 方法：收集38例新鮮膠質(zhì)瘤標本，其中包括18例低度惡性(I-II級)及20例高度惡性者(Ⅲ-IV級)；另取術(shù)前無瞳孔散大的腦外傷病人行內(nèi)減壓手術(shù)的新鮮腦組織7例作為對照。用RT-PCR方法檢測其MMP2 mRNA的表達。另收集這些膠質(zhì)瘤組織和腦組織

5、的石蠟標本，用免疫組織化學(xué)檢測MMP2蛋白、VⅢ因子、Ki-67的表達情況。并分析MMP2蛋白的表達與膠質(zhì)瘤的病理分級、膠質(zhì)瘤Ki-67標記指數(shù)(LI)、微血管密度(MVD)的關(guān)系。 用姜黃素干預(yù)膠質(zhì)瘤細胞，檢測姜黃素對膠質(zhì)瘤細胞MMP2表達的影響；再用姜黃素干預(yù)膠質(zhì)瘤細胞和HUVEC，用MTT法檢測膠質(zhì)瘤細胞細胞及HUVEC的增殖活性；結(jié)晶紫染色法檢測HUVEC的粘附及遷移能力。 結(jié)果：①檢測到MMP2 mRNA及其蛋

6、白在人腦膠質(zhì)瘤中存在表達，MMP2蛋白表達主要定位于膠質(zhì)瘤細胞的胞漿，且其表達與腫瘤的惡性程度(x2=3.993，P<0.01)，Ki-67((r=0.661，P<0.01)及MVD(r=0.557，P<0.01)有正相關(guān)性；MMP2在正常腦組織中沒有表達。②膠質(zhì)瘤細胞中存在MMP2mRNA的表達。姜黃素對膠質(zhì)瘤細胞中MMP2 mRNA表達有顯著的下調(diào)作用(P<0.01)。③加入姜黃素干預(yù)后，膠質(zhì)瘤細胞的增殖活性亦明顯低于對照組(P<0

7、.01)；姜黃素對單純和混合培養(yǎng)的HUVEC增殖活性、遷移能力有明顯影響(P<0.01)。 結(jié)論： 1.人腦膠質(zhì)瘤組織和細胞中可檢測出MMP2表達。MMP2的表達與膠質(zhì)瘤惡性程度、Ki-67及MVD具有正相關(guān)性。提示MMP2在膠質(zhì)瘤的生長、侵襲中發(fā)揮重要作用。 2.姜黃素可以下調(diào)膠質(zhì)瘤細胞MMP2 mRNA的表達。 3.姜黃素可以明顯抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖活性。 4.姜黃素可以抑制HUVEC的增殖、