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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察腫節(jié)風(fēng)對(duì)腮腺放射性損傷的防護(hù)作用,研究其可能的防護(hù)機(jī)制以及腮腺放射性損傷的作用機(jī)理。
方法:
(1)采用實(shí)驗(yàn)用巴馬小型豬作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,建立腫節(jié)風(fēng)干預(yù)下的腮腺放射性損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型:將45頭小型豬隨機(jī)分入空白對(duì)照組(空白組)、單純照射組(單照組)以及腫節(jié)風(fēng)+照射組(藥照組),每組15頭;照射方式采用γ射線雙側(cè)單后野垂直照射腮腺組織,DT15Gy/1次;給藥方式為照射前一周開(kāi)始按照0.3g/Kg體重
2、的藥量經(jīng)口腔給予腫節(jié)風(fēng)配方顆粒溶液,直到觀察結(jié)束。建立起腫節(jié)風(fēng)干預(yù)下的腮腺放射性損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,同時(shí)觀察小型豬的行為體征以及體重變化,取照射后10天、40天、90天3個(gè)時(shí)間點(diǎn),隨機(jī)摘取每組5頭小型豬的腮腺進(jìn)行研究。
(2)用RT-PCR法及Western blotting法分別檢測(cè)照射后10天、40天、90天腮腺中Bcl-2、Bax、P53和Caspase3 mRNA和蛋白表達(dá)的變化:比較各組相同時(shí)段不同基因mRNA及蛋白的
3、表達(dá)差異,組內(nèi)不同時(shí)段同一基因mRNA及蛋白表達(dá)的變化,研究腮腺放射損傷后細(xì)胞的凋亡和增殖,明確腮腺放射性損傷作用機(jī)理的同時(shí)探尋腫節(jié)風(fēng)抗放射性損傷的防護(hù)機(jī)制。
結(jié)果:
(1)成功建立起腫節(jié)風(fēng)干預(yù)下的腮腺放射性損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型;藥照組的小型豬對(duì)放射性損傷的耐受較單照組好,恢復(fù)較單照組快。
(2)RT-PCR與Western blotting的結(jié)果呈現(xiàn)出相同變化趨勢(shì):與空白組相比,單照組和藥照組中Bax、P53
4、及Caspase3的mRNA和蛋白表達(dá)水平均有所提高,三者的組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其中單照組高于藥照組;Bcl-2的表達(dá),空白組高于藥照組,藥照組高于單照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組內(nèi),空白組中各mRNA和蛋白的表達(dá)無(wú)明顯變化;單照組中Bax、P53及Caspase3的表達(dá)水平呈逐漸增高趨勢(shì),Bcl-2則為逐漸降低趨勢(shì);藥照組中,Bax、P53及Caspase3的表達(dá)水平呈先高后低的改變,Bcl-2則為
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