膠質(zhì)瘤干細(xì)胞壁龕的實驗研究.pdf

1、目的：檢測CD133、Nestin、CD31和PCNA在腦腫瘤干細(xì)胞壁龕中的表達，探討腦腫瘤干細(xì)胞生存的微環(huán)境——壁龕的結(jié)構(gòu)、分布、內(nèi)部細(xì)胞的增殖潛能及其與微血管系統(tǒng)的相關(guān)性。
　　 方法：(1)采用免疫組織化學(xué)SP法檢測CD133、Nestin、CD31和PCNA在65例膠質(zhì)瘤組織中的表達。(2)采用免疫熒光雙染法檢測CD133/CD31、CD133/PCNA、CD133/Nestin、Nestin/CD31和Nestin/P

2、CNA的共表達情況，計算CD133+壁龕、CD133+血管、PCNA+細(xì)胞、CD31+血管、Nestin+壁龕和Nestin+血管所占的百分率，并將各陽性指標(biāo)的表達進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果：(1) 壁龕在各級別膠質(zhì)瘤中均存在，在低級別組中，壁龕陽性率較低，與相鄰壁龕之間界限清晰，而在高級別組中，壁龕陽性率高，壁龕之間無明顯界限。并且，隨著腫瘤級別的升高，CD133+壁龕(P=0.000)和Nestin+壁龕(P=0.000)

3、的表達均越來越高。(2)在不同的病理級別組中，壁龕內(nèi)PCNA+細(xì)胞的表達有明顯差異(F=44.782,P=0.000)，在免疫熒光共表達中，隨之病理級別的升高，CD133+/PCNA+細(xì)胞(F=30.668,P=0.000)或Nestin+/PCNA+細(xì)胞(F=15.316,P=0.000)的百分比差異同樣均有顯著性，并且，免疫熒光雙染相比免疫組化單染更能代表壁龕內(nèi)腦腫瘤干細(xì)胞的增殖活性研究，并且，壁龕中除CD133+/Nestin+B

4、TSCs外，還可見CD133+/Nestin-細(xì)胞、CD133-/PCNA+細(xì)胞等亞群細(xì)胞。(3) 低級別組中，在CD133+壁龕或Nestin+壁龕分布的區(qū)域可見CD133+血管或Nestin+血管分布較少。在高級別組中，該區(qū)域則有豐富的CD133+血管或Nestin+血管分布，同時可見腫瘤干細(xì)胞包繞著血管生長。并且，CD133+壁龕或Nestin+壁龕的百分比與CD133+血管（r=0.945,P<0.01）或Nestin+血管（r

5、=0.727,P<0.01）的表達呈正相關(guān)。免疫熒光雙染可見，CD133+細(xì)胞或Nestin+細(xì)胞均聚集于CD31+血管周圍，并且，CD133+/CD31+、Nestin+/CD31+細(xì)胞共表達于血管內(nèi)皮細(xì)胞。
　　 結(jié)論：(1) 隨著腫瘤級別的增加，BTSCs壁龕的表達明顯增加，并且其形態(tài)和結(jié)構(gòu)成分都在不斷變化。(2) 隨著腫瘤惡性程度的增加，壁龕內(nèi)腦腫瘤干細(xì)胞的增殖活性和異形性明顯增加，同時還發(fā)現(xiàn)作為BTSCs與普通腦腫瘤細(xì)