防己諾林堿抑制前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖的機(jī)制研究.pdf

1、粉防己（fenfangji），RadiXStephaniae Tetrandrae，別名漢房己，白木香，為房己科植物石蟾蜍Stephania Tetrandra S.Moore的根。含多種異喹啉生物堿，主要藥用成分為粉防己堿（tetrandrine）和防己諾林堿（fangchinoline）。其目前主要的功效有利水消腫，祛風(fēng)止痛。用于水腫腳氣，小便不利，風(fēng)濕痹痛，濕疹瘡毒，高血壓癥。目前研究發(fā)現(xiàn)粉防己堿能顯著抑制腫瘤細(xì)胞增殖，因此具有很

2、好的藥物開發(fā)價(jià)值。但是對(duì)其結(jié)構(gòu)非常相似的防己諾林堿的抗腫瘤研究則相對(duì)甚少，本文將以人類前列腺癌PC-3細(xì)胞為研究材料，應(yīng)用RT-PCR，Western blotting以及裸鼠模型等實(shí)驗(yàn)方法研究防己諾林堿對(duì)PC-3細(xì)胞的增殖影響，主要研究結(jié)果包括以下幾個(gè)方面:
　　 1)防己諾林堿具有劑量和時(shí)間依賴性地抑制前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖的作用。MTT實(shí)驗(yàn)顯示分別用10、20、30 μm/ml防己諾林堿處理PC-3細(xì)胞1-4天后,30

3、μm/ml防己諾林堿處理細(xì)胞4天后的抑制效果最好，達(dá)到86％抑制率；通過(guò)對(duì)細(xì)胞周期研究發(fā)現(xiàn)30 μm/ml防己諾林堿處理PC-3細(xì)胞1天后，PC-3細(xì)胞明顯被阻斷在G1/S期。Western blotting結(jié)果則進(jìn)一步證實(shí)防己諾林堿能調(diào)節(jié)PC-3細(xì)胞中細(xì)胞周期相關(guān)蛋白Cyclin D1、p27以及PCNA的表達(dá)。30 μm/ml防己諾林堿處理PC-3細(xì)胞1天后，參與細(xì)胞周期G1/S期的Cyclin D1和PCNA明顯下降，而抑制細(xì)胞增

4、殖的p27蛋白表達(dá)量顯著性上升。
　　 2)Western blotting檢測(cè)PC-3細(xì)胞在經(jīng)過(guò)防己諾林堿處理后，細(xì)胞內(nèi)參與細(xì)胞凋亡的相關(guān)蛋白的表達(dá)量變化。PC-3細(xì)胞在30 μm/ml防己諾林堿處理1天后，細(xì)胞內(nèi)的促凋亡蛋白Bax和激活型Caspase-3蛋白表達(dá)量都顯著上升，同時(shí)抗細(xì)胞凋亡的Bcl-2蛋白表達(dá)量則顯著下降。
　　 3)本文構(gòu)建裸鼠模型來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證防己諾林堿的抑制腫瘤生長(zhǎng)效果，結(jié)果顯示連續(xù)用防己諾林堿