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1、 目的:通過基線等比增減設(shè)計研究益母草總生物堿與黃芪總皂苷不同配比組分對小、大鼠前列腺增生模型的影響,完善中藥有效組分配比篩選模式,篩選出防治前列腺增生的最優(yōu)活性配比組分,為益芪膠囊的后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。
方法:篩選實驗:通過基線等比增減設(shè)計益母草總生物堿與黃芪總皂苷10:0、8:2、7:3、6:4、5:5、4:6、3:7、2:8、0:10不同配比組分對小、大鼠前列腺增生模型的影響,采用綜合權(quán)重法評價益母草總生物堿與黃芪總皂
2、苷各配比組分對小、大鼠前列腺增生模型的影響結(jié)果,篩選出益母草總生物堿與黃芪總皂苷較優(yōu)配比組分;驗證實驗:通過小、大鼠前列腺增生模型實驗驗證篩選實驗結(jié)果,采用綜合權(quán)重法評價驗證實驗結(jié)果,最終確定益母草總生物堿與黃芪總皂苷防治前列腺增生的最優(yōu)活性配比組分。
采用丙酸睪酮法誘導(dǎo)小鼠前列腺增生模型:篩選實驗采用去勢小鼠,雄性小鼠麻醉后,經(jīng)陰囊摘除其雙側(cè)睪丸,從去勢第 3天起,每只小鼠按 5mg/kg皮下注射丙酸睪酮(溶于大豆油),每
3、日 1 次,連續(xù) 3 周;驗證實驗小鼠每日皮下注射丙酸睪酮 5mg/kg(溶于大豆油),連續(xù) 3 周;末次給藥 2h 后,取血,處死小鼠,測定小鼠的前列腺濕重、前列腺指數(shù),篩選實驗測定雙氫睪酮(DHT)水平及前列腺形態(tài)變化;驗證實驗測定雙氫睪酮(DHT)、睪酮(T)、雌二醇(E2)水平、前列腺及相關(guān)組織形態(tài)變化。采用丙酸睪酮法誘導(dǎo)大鼠前列腺增生模型:從大鼠去勢第8天起,每日皮下注射丙酸睪酮4mg/kg(溶于大豆油),連續(xù)30d。末次給藥
4、2h后,取血,然后處死大鼠,測定大鼠的前列腺濕重、前列腺指數(shù),篩選實驗測定睪酮(T)、雌二醇(E2)、前列腺酸性磷酸酶(PACP)水平及前列腺組織形態(tài)變化;驗證實驗測定雙氫睪酮(DHT)、睪酮(T)、雌二醇(E2)、前列腺酸性磷酸酶(PACP)水平、前列腺及相關(guān)組織形態(tài)變化。
結(jié)果:篩選實驗結(jié)果:小鼠、大鼠前列腺增生模型均造模成功。益母草總生物堿與黃芪總皂苷不同配比組分均可顯著降低小、大鼠前列腺濕重和前列腺指數(shù),顯著改善小、
5、大鼠前列腺組織的病理改變,顯著降低小鼠血清 DHT 水平;顯著降低大鼠血清 T 和 PACP 水平,顯著升高血清 E2水平。用綜合權(quán)重法評價,以6:4為最優(yōu)配比組分。驗證實驗結(jié)果:益母草總生物堿與黃芪總皂苷7:3、6:4、5:5大、中、小劑量組均可顯著降低小鼠血清T和DHT水平,顯著升高血清E2水平,顯著改善小鼠前列腺、睪丸、胸腺和脾臟的病理變化,5:5大劑量組、6:4大、中劑量組均可顯著降低小鼠前列腺濕重和前列腺指數(shù);6:4、5:5
6、大、中、小劑量組均可降低大鼠前列腺組織中T、DHT和PACP水平,明顯升高血清E2水平,顯著 改善大鼠前列腺、附睪、胸腺和脾臟的病理變化,5:5大劑量組、6:4大、中劑量組可顯著降低大鼠前列腺濕重。用綜合權(quán)重法評價,以益母草總生物堿與黃芪總皂苷6:4為最優(yōu)配比組分。
結(jié)論:篩選實驗:基線等比增減設(shè)計益母草總生物堿與黃芪總皂苷不同配比組分中以6:4為防治前列腺增生優(yōu)選配比組分;驗證實驗:以益母草總生物堿與黃芪總皂苷6:4為中心
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