蘋果梨離體葉片再生體系的建立.pdf

1、蘋果梨(Pyrus reschneideriRehd)，屬薔薇科(Rosaceae)梨屬(PyrusL.)植物，是延邊地區(qū)的主栽梨品種。建立蘋果梨穩(wěn)定、高效的再生體系，是進(jìn)行轉(zhuǎn)基因育種的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，本試驗(yàn)以蘋果梨為材料，研究了影響其無菌體系和再生體系建立的一系列因素，得到以下結(jié)論：
　　1．不同來源的外植體適宜的消毒時(shí)間不同。水培萌發(fā)莖段適宜的消毒時(shí)間為2min，萌芽期莖段的消毒時(shí)間為3min，而休眠芽的消毒時(shí)間最長為5min。

2、適宜蘋果梨水培萌發(fā)莖段及萌芽期莖段的初代培養(yǎng)基為1/3MS+1.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1IBA+75 mg·L-1Vc，成活率分別為60.12％和59.85%；適宜休眠芽生長的初代培養(yǎng)基為MS+1.5mg·L-16-BA+0.3mg·L-1IBA+7.5 mg·L-1GA，萌芽率高達(dá)89.62%。但在初代培養(yǎng)階段，三種材料都無增殖生長，因此應(yīng)及早轉(zhuǎn)接到繼代培養(yǎng)基中；
　　2.水培萌發(fā)及萌芽期的莖段在1/2MS

3、+1.5 mg·L-16-BA+0.3 mg·L-1NAA生長狀況良好，增殖倍數(shù)分別為5.12和4.89，而休眠芽增殖培養(yǎng)則需在1/2MS+1.5 mg·L-16-BA+0.3mg·L-1NAA和NN69+1.0mg·L-16-BA+0.3mg·L-1NA A兩種培養(yǎng)基交替使用的情況下正常生長，增殖倍數(shù)在4.0左右；
　　3．適宜蘋果梨分化的外植體為繼代4次以上的組培苗葉片，以葉背面接觸培養(yǎng)基，將其接種在NN69+1.5 mg·L