比格犬糞便菌群16S rRNA多樣性分析及主要益生菌的分離鑒定.pdf

1、Qingdao Agricultural UniversityThe Thesis of Professional MasterExplore the intestinal flora of beagle dog by 16S rRNADiversity Analysis，Isolation and Identification ofmain probioticsGraduate with Professional Master Deg

2、ree：Liu HuiMentor: Jianxin WenSecond Mentor: Guoqing LiuType of Professional Degree：Master of Veterinary MedicineMay, 2017青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文 摘要1比格犬 比格犬糞便菌群 糞便菌群 16S rRNA 多樣性 多樣性分析 分析及主要益生菌的分離鑒定 主要益生菌的分離鑒定摘 要比格犬在生命科學(xué)上的研究意義重大，

3、比格犬糞便菌群分析是非常有必要的。本試驗(yàn)對(duì)比格犬糞便中微生物的 16S rRNA V4 區(qū)域 DNA 進(jìn)行測(cè)序，對(duì)大量數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，揭示糞便中微生物的種類(lèi)以及它們之間的相對(duì)豐度和進(jìn)化關(guān)系，探討糞便微生物的多樣性。通過(guò)分析可知不同年齡段的比格犬糞便菌群的多樣性和結(jié)構(gòu)都有所不同。比格犬專(zhuān)用微生態(tài)制劑的研究迫在眉睫。本研究從比格犬糞便內(nèi)分離并選擇 4 株常見(jiàn)益生菌，對(duì)其進(jìn)行分離純化，形態(tài)學(xué)、生理生化、分子生物學(xué)鑒定及生物學(xué)特性研究：生長(zhǎng)曲

4、線(xiàn)測(cè)定，耐熱性、耐酸性、耐膽鹽、耐胃液、耐腸液試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明：43 號(hào)菌為乳白色菌落，有特殊酸味，經(jīng)鑒定為嗜酸乳酸桿菌（Lactobacillus acidophilus）。18 號(hào)菌常成對(duì)出現(xiàn)，在 KF培養(yǎng)基上呈棗紅色，經(jīng)鑒定為屎腸球菌（Enterococcus faecium）。25 號(hào)菌在培養(yǎng)基上呈不規(guī)則圓形，邊緣不整齊，有粘滯感，經(jīng)鑒定為地衣芽胞桿菌（Bacillus licheniformis）。1 號(hào)菌在 WL 培養(yǎng)基上

5、綠色，生長(zhǎng)速度較慢，經(jīng)鑒定為熱帶假絲酵母菌（Candida tropicalis）。實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，43 號(hào)菌、18 號(hào)菌應(yīng)當(dāng)尤為注意加工溫度和時(shí)間的控制。這四株菌在強(qiáng)酸強(qiáng)堿環(huán)境中性能良好，為實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用提供參考。安全性試驗(yàn)顯示，這四株菌對(duì)小白鼠無(wú)致死性，無(wú)毒副作用。試驗(yàn)組與對(duì)照組小白鼠體重、體溫?zé)o顯著性差異（P >0.05）。25 號(hào)菌可能對(duì)公鼠和母鼠腎臟有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用，18 號(hào)菌對(duì)公鼠有促進(jìn)作用。43 號(hào)、18 號(hào)、25 號(hào)