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文檔簡介
1、腫瘤標志物對于腫瘤的早期診斷、療效監(jiān)控以及指導(dǎo)治療具有重要意義,而實現(xiàn)對腫瘤標志物的靈敏、高效檢測是發(fā)揮腫瘤標志物作用的關(guān)鍵所在。本論文主要圍繞腫瘤標志物的化學(xué)發(fā)光免疫芯片的構(gòu)建以及多種腫瘤標志物同時檢測方面開展工作。具體研究內(nèi)容如下:
(1)構(gòu)建單一腫瘤標志物的化學(xué)發(fā)光免疫檢測芯片,并實現(xiàn)對癌胚抗原(CEA)的定量檢測。玻璃基片用酸預(yù)處理,使其充分暴露玻片表面的羥基,然后用γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(GPMS)
2、進行硅烷化處理,得到環(huán)氧端基修飾的玻璃基質(zhì),該基質(zhì)可與CEA抗體分子中賴氨酸殘基上的活性氨基反應(yīng)從而將CEA抗體分子固定在基片表面構(gòu)建出CEA檢測芯片;通過夾心免疫反應(yīng)將待測CEA抗原以及堿性磷酸酶(ALP)酶標二抗結(jié)合到芯片表面,利用ALP酶對于發(fā)光底物的催化作用實現(xiàn)對CEA的定量檢測。CEA的檢測線性范圍為0.5-120μg/L,線性相關(guān)系數(shù)R=0.9968。
(2)在上述單組分檢測芯片基礎(chǔ)上通過CEA抗體和糖抗原19
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