IGF-IR、IGF-ⅡR反義基因?qū)MMC-7721肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、IGF-ⅠR、IGF-ⅡR以自分泌和/旁分泌方式過量表達(dá)從而刺激肝癌細(xì)胞生長是肝癌細(xì)胞惡性增殖的重要原因之一.該實(shí)驗(yàn)應(yīng)用反義技術(shù)原理,在已轉(zhuǎn)染IGF-ⅠR反義基因的肝癌SMMC-7721(7721-IGF-ⅠR-AS)細(xì)胞基礎(chǔ)上,繼續(xù)利用IGF-ⅡR反義基因真核表達(dá)系統(tǒng),通過DOTAP脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù),再將IGF-ⅡR反義基因?qū)朐摷?xì)胞,從而切斷IGF-Ⅱ?qū)GF-ⅠR和IGF-ⅡR這兩條信號(hào)環(huán)路的刺激.PCR及Southern雜交

2、實(shí)驗(yàn)表明,帶有IGF-ⅡR反義基因的重組體序列已經(jīng)整合到7721-IGF-ⅠR-AS細(xì)胞染色體上.研究發(fā)現(xiàn),SMMC-7721細(xì)胞在轉(zhuǎn)染IGF-ⅠR和IGF-ⅡR反義基因以后,光鏡、電鏡下腫瘤細(xì)胞的惡性形態(tài)有一定改善,轉(zhuǎn)染克隆形成數(shù)顯著下降(P<0.05),在軟瓊脂培養(yǎng)基中生長能力明顯降低(P<0.01),在裸鼠體內(nèi)的致瘤能力也明顯下降(P<0.05).而轉(zhuǎn)染IGF-ⅠR、IGF-ⅡR正義基因的SMMC-7721及未轉(zhuǎn)染外源基因的SMM