大鼠坐骨神經(jīng)損傷與再生中神經(jīng)元GAP-43mRNA表達(dá)和蛋白合成的研究.pdf

1、目的:通過(guò)研究周圍神經(jīng)損傷與再生過(guò)程中神經(jīng)元生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(Growth-associated protein,GAP-43)mRNA表達(dá)和蛋白質(zhì)合成的變化規(guī)律,為進(jìn)一步闡明GAP-43mRNA的表達(dá)調(diào)控機(jī)制及該蛋白質(zhì)在神經(jīng)再生中的作用提供理論依據(jù). 方法:1.建立大鼠坐骨神經(jīng)中段鉗夾損傷動(dòng)物模型,術(shù)后分別存活1、2、4、7、14、30、60天.動(dòng)物經(jīng)主動(dòng)脈灌注固定后,取脊髓L<,4>-L<,6>節(jié)段、與坐骨神經(jīng)相連的背根神經(jīng)節(jié)(L<,5

2、>、L<,6>)和坐骨神經(jīng)纖維進(jìn)行冰凍切片.2.將切片用原位雜交法檢測(cè)神經(jīng)元GAP-43mRNA表達(dá),進(jìn)行圖像分析.3.GAP-43多克隆抗體免疫細(xì)胞化學(xué)染色后圖像分析,觀察GAP-43合成的變化規(guī)律.4.光鏡觀察坐骨神經(jīng)損傷后的再生情況:透射電鏡觀察神經(jīng)損傷再主過(guò)程中,脊髓腹角、背根神經(jīng)節(jié)和神經(jīng)纖維的超微結(jié)構(gòu)變化.結(jié)論:1.神經(jīng)元GAP-43mRNA表達(dá)受軸突斷裂誘導(dǎo)顯著升高并與神經(jīng)元再生狀態(tài)密切相關(guān).2.GAP-43表達(dá)升高,與神經(jīng)