鞣酸抑制HIV-1與靶細(xì)胞融合的作用機(jī)制研究和來(lái)源于放線菌的HIV-1融合抑制劑的篩選.pdf

1、該研究使用p24和細(xì)胞融合的方法檢測(cè)鞣酸對(duì)HIV-1感染的抑制作用,發(fā)現(xiàn)鞣酸也能抑制HIV-1與靶細(xì)胞的融合,并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了研究,證明了鞣酸也能抑制HIV與靶細(xì)胞的融合,從而在HIV感染的早期階段抑制HIV的復(fù)制.鞣酸抑制細(xì)胞融合的機(jī)制與其抑制HIV-1 gp41核心結(jié)構(gòu)的形成有關(guān),而gp41六股螺旋束的形成能將HIV包膜與靶細(xì)胞膜拉近,啟動(dòng)二者的融合,完成病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞的感染過(guò)程.另外,我們采用夾心ELISA法對(duì)985種放線菌

2、樣品進(jìn)行初篩和復(fù)篩,篩選得到對(duì)HIV-1 gp41六股螺旋束形成有較強(qiáng)抑制作用的陽(yáng)性菌株83種,其中有6個(gè)樣品能抑制細(xì)胞融合和HIV-1誘導(dǎo)的CPE效應(yīng),效果最好的一個(gè)是25-04,電鏡掃描確定其為吸水鏈霉菌的一個(gè)種屬.我們考察確定了25-04的發(fā)酵培養(yǎng)條件,并對(duì)其發(fā)酵液提取物用沉淀法和柱層析法進(jìn)行初步的分離純化.分離結(jié)果表示活性成份屬于大分子物質(zhì),Sevaga法排除了其是蛋白質(zhì)的可能,接著通過(guò)硫酸-酚法的實(shí)驗(yàn)推測(cè)活性物質(zhì)是多糖.分子量