木霉菌REMI轉化子誘導黃瓜抗白粉病方法與機理的研究.pdf

1、本文開展了木霉菌REMI轉化子誘導黃瓜抗白粉病方法與機理的研究，結果如下： 1.篩選出了對黃瓜白粉病具有誘導抗性作用的木霉菌轉化子3株。本文利用木霉菌出發(fā)菌株T23及其300余株REMI轉化子的發(fā)酵液處理黃瓜幼苗的根部，隨后挑戰(zhàn)接種白粉病菌，調查病情指數。結果表明轉化子F3對白粉菌的防效最高，達到66.7％，且發(fā)現經轉化子F3發(fā)酵液處理后黃瓜葉片防御酶PAL、PPO、CAT、POD、SOD活性以及蛋白含量與對照相比均有顯著變化。

2、 2.初步研究了轉化子F3發(fā)酵液的活性成分。采用透析和濃縮的方法，將發(fā)酵液分為蛋白組分和非蛋白組分，分別處理黃瓜幼苗根部，結果表明原始發(fā)酵液具有較好的誘導抗病效果，而發(fā)酵液中的蛋白和非蛋白組分分別處理黃瓜幼苗時則不產生誘導抗病效果，同時將蛋白和非蛋白組分再次混合仍可以產生防病效果。以上結果證明F3發(fā)酵液中誘導黃瓜抗白粉病的物質是蛋白和所有非蛋白成分共同作用的結果，而不是其中單一組分的作用。在此基礎上，研制了一種以木霉菌發(fā)酵液為主

3、要組分的誘抗型種衣劑。該種衣劑可有效控制黃瓜白粉病發(fā)生，防效最高達到74％。 3.首次利用植物蛋白質組學技術，研究了木霉菌及REMI轉化子誘導黃瓜抗白粉病的機理。本研究建立了蛋白質提取和雙向電泳分離技術。通過雙向電泳及相應的分析軟件(PDQuest<'TM> 2-D software)可將不同處理的幼苗葉片蛋白進行分離。結果發(fā)現種衣劑處理的葉片產生22種上游調控蛋白和7種下游調控蛋白，與對照的蛋白質組圖譜相似系數為0.813。利

4、用質譜分析研究了接種白粉病菌后黃瓜葉片病程抗性相關蛋白質組的變化，得到了5個相關蛋白：putative chlorophyll-A-B-binding protein[Castanea sativa]： Chlorophyll a-b binding protein of LHC11 typel，chloroplast precursor(CAB)(LHCP)； ribulose 1，5 bisphosphate carboxylase

5、[Pisum sativum]；Plastocyanin；Ribulose bisphosphate carboxylase small chain，chloroplast precursor(RuBisCO small subunit)。其中ribulose 1，5 bisphosphate carboxylase[Pisum sativum]與Plastocyanin均為植物光合作用的關鍵蛋白。本研究明確了黃瓜光合作用中相關蛋白與抗

6、白粉病的關系，此結果在國內外未見報導。 4.利用農作物殘體和木霉菌T21創(chuàng)制出新型生物菌肥。木霉菌T21利用黃瓜莖葉等殘體為營養(yǎng)基質最佳發(fā)酵條件是：含水量100％；接種量10％；發(fā)酵溫度28℃，適宜的發(fā)酵周期為7-9d。利用固體發(fā)酵所得生物菌肥處理后的黃瓜葉片大，顏色深，植株高，而對照黃瓜葉片較小，顏色較淺，長勢較弱。菌肥對黃瓜植株生長有明顯的促進作用，株高比對照高13％；鮮重比對照高25％；干重比對照高27.5％。方差分析表明