小麥抗白粉病相關(guān)基因的克隆研究.pdf_第1頁(yè)
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1、小麥白粉病是嚴(yán)重危害小麥生產(chǎn)的病害之一,小麥-黑麥1BL/1RS易位系99/2439對(duì)白粉病表現(xiàn)為近免疫,對(duì)其抗白粉病相關(guān)基因進(jìn)行克隆研究不僅有利于闡明其抗病機(jī)制,而且對(duì)抗病育種有重大意義.本研究進(jìn)行了以下幾方面的研究:1.構(gòu)建cDNA文庫(kù)是克隆基因的基礎(chǔ),本研究用質(zhì)粒載體pGEM-T構(gòu)建了經(jīng)白粉菌誘導(dǎo)1、4、12、24、48和72 h的小麥-黑麥1BL/1RS易位系99/2439葉片cDNA文庫(kù)一個(gè).文庫(kù)寄主菌為E.coli DH10

2、B,誘導(dǎo)文庫(kù)平均插入片段為1kb左右.主要分布在800 bp-2 Kb之間.2.用RACE技術(shù)對(duì)經(jīng)白粉菌誘導(dǎo)24 h的小麥-黑麥1BL/1RS易位系99/2439葉片的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增,獲得了小麥類(lèi)受體蛋白激酶基因(RLK)全長(zhǎng)cDNA克隆(TaLRK)(GenBank登錄號(hào):AY584533).3.用RACE技術(shù)對(duì)經(jīng)白粉菌誘導(dǎo)24 h的小麥-黑麥1BL/1RS易位系99/2439葉片的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增,獲得了與小麥和大麥Mlo同源性很

3、高的基因序列(TaMlo-B1d)(GenBank登錄號(hào):AY584534).4.用RACE技術(shù)對(duì)經(jīng)白粉菌誘導(dǎo)24 h的小麥-黑麥1BL/1RS易位系99/2439葉片的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增,獲得了與大麥HvEDR1基因高度同源的小麥TaEDR1基因全長(zhǎng)cDNA克隆(GenBank登錄號(hào):AY743662).首次提供了證明普通小麥中存在EDR1基因同源物的分子證據(jù).利用半定量RT-PCR技術(shù),研究了TaEDR1基因的表達(dá),發(fā)現(xiàn)該基因在白粉菌

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