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文檔簡介
1、目的：復(fù)制實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠模型，研究胰島素對糖尿病大鼠腎臟肌球蛋白輕鏈激酶(myosinlightchainkinase，MLCK)表達(dá)的影響，通過觀察MLCK的動(dòng)態(tài)變化，探討肌球蛋白輕鏈激酶與糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制的相關(guān)性。 方法：80只雄性SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，隨機(jī)分為對照組和實(shí)驗(yàn)組。通過腹腔注射鏈尿佐菌素(streptozotocin，STZ)復(fù)制大鼠糖尿病模型。當(dāng)大鼠血糖值大于16.7mmol/L并持續(xù)至少5天，表明糖尿病
2、動(dòng)物模型已建立。糖尿病大鼠隨機(jī)分為糖尿病組(4周和12周)和胰島素治療組(4周和12周)。治療組大鼠給予每天3單位魚精蛋白鋅胰島素皮下注射。4周和12周時(shí)，分別用戊巴比妥鈉麻醉大鼠，頸動(dòng)脈取血用于血糖測定；取腎臟用冷PBS漂洗后，一只腎被切割并固定于4％多聚甲醛中，石蠟包埋、切片用于免疫組織化學(xué)分析和HE染色；另一只腎于-80℃冷凍保存或制備蛋白質(zhì)樣品用于Westernblot分析MLCK等表達(dá)。 結(jié)論：長期高血糖可能導(dǎo)致肌球蛋
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