條件性RNAi技術(shù)降低FGFR2的表達對小鼠脛骨骨折愈合的影響.pdf

1、目的：成纖維細(xì)胞生長因子及其受體(FGFs/FGFRs)存在與頭顱、多種含上皮細(xì)胞器官、組織(肺、腎、皮膚)及骨骼等組織。其中FGFs/FGFRs在骨骼發(fā)育和骨折愈合中起了重要的作用，許多發(fā)育性疾病和骨折的延遲愈合或者不愈合都與FGFs/FGFRs有重要的關(guān)系。利用轉(zhuǎn)基因小鼠建造FGFR2僅在成骨細(xì)胞的表達中降低的骨折模型，用一種新的方法來探討FGFR2在骨折愈合中的作用和機制，以便更好的了解骨折愈合中存在的問題，向臨床治療骨折提供更好

2、的理論基礎(chǔ)和思路。 方法：把成骨細(xì)胞特異表達Cre重組蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠OC-Cre和條件性FGFR2敲低小鼠FGFR2-RNAi交配，得到雙轉(zhuǎn)基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre，這種小鼠就只在成骨細(xì)胞中FGFR2表達降低，然后制造骨折模型，觀察骨折愈合情況。1．通過整體動物形態(tài)觀察；2 X片觀察3組織切片觀察。 結(jié)果：1．雙基因小鼠FGFR2KNAi；OC-Cre比同組對照小鼠在整體形態(tài)上表現(xiàn)為矮小，P<0.001

3、。2． X片對比觀察，野生型小鼠在21天時骨折全部愈合，雙基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre在21天時都沒有愈合。在28天時才出現(xiàn)骨折愈合。雙基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre比同組對照野生型小鼠骨折愈合明顯減慢。 3．通過對組織切片觀察，發(fā)現(xiàn)雙轉(zhuǎn)基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre比同組對照小鼠骨痂生長量少；通過特殊染色方法計算骨折不同時期的軟骨面積，發(fā)現(xiàn)雙轉(zhuǎn)基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre比同組對照小鼠軟骨面