Caveolin-1在子宮頸癌及上皮內瘤變中的表達及其與VEGF關系.pdf

1、[研究背景與目的]
　　 宮頸癌是最常見的女性惡性腫瘤之一，在一些發(fā)展中國家其發(fā)病率居第一位。近些年隨著普查普治工作的開展，我國宮頸癌的死亡率明顯下降，但年輕婦女宮頸癌的發(fā)病率有上升的趨勢，給家庭和社會帶來了沉重的負擔。隨著現(xiàn)代細胞和分子生物學的進展，人們認識到宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個多階段、多步驟的復雜過程，涉及到許多腫瘤相關分子。
　　 Caveolae是近年發(fā)現(xiàn)的一個候選抑癌基因，其編碼的Caveolin-1是細胞

2、膜上的一種支架蛋白。Caveolin-1是一種候選抑癌基因，參與調控腫瘤細胞增殖、粘附、侵襲轉移及凋亡。Caveolin-1基因在多種腫瘤中（如肝癌、卵巢癌、乳腺癌、胃腺癌等）出現(xiàn)缺失或斷裂，提示Caveolin-1與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。caveolin-1在卵巢癌組織中表達明顯降低，且隨細胞分化程度降低而減少，隨臨床分期的增加而降低。Caveolin-1作為前列腺癌一種新的腫瘤標志物，可以進行早期診斷及預后判斷價值，為前列腺癌早發(fā)

3、現(xiàn)、早治療提供新途徑。腎細胞癌中Caveolin-1的表達高低與生存預后有明顯的相關性，其表達高，預后越差;反之，表達越低，預后越好。以上研究均表明Caveolin-1正常表達使細胞維持良性生長、分化的表型，在腫瘤惡性轉化、增殖的過程中Caveolin-1表達水平下調，可能促進了腫瘤細胞的侵襲和轉移。目前國內外對Caveolin-1在腫瘤中表達存有爭議，在宮頸癌組織中的表達情況在國內外相關文獻報道極少，僅見國內報道Caveolin-1在

4、宮頸癌中的表達與臨床分期、病理分級及淋巴結轉移有關。
　　 血管內皮生長因子(VEGF)是一種高度特異性的血管內皮細胞有絲分裂素，通過與其特異性受體結合，引起一系列信號傳導，從而發(fā)揮生物學功能。近年研究發(fā)現(xiàn)血管內皮生長因子(VEGF)是與腫瘤血管形成有關的重要調控因子，與腫瘤的生長、侵襲和轉移密切相關。血管內皮生長因子(VEGF)主要作用于處于增生狀態(tài)下的血管內皮細胞，盡管其在多種細胞中都有表達，但通常只有腫瘤細胞才能釋放。惡性

5、腫瘤發(fā)生過程中血管生成有著其重要作用，血管內皮生長因子(VEGF)在腫瘤血管形成中起調控作用。在宮頸癌的生長過程中，新生血管的形成發(fā)揮著重要的作用，是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的前提條件。新生血管成為腫瘤組織從宿主獲取養(yǎng)分的通路，同時腫瘤細胞通過新生血管轉達送到身體的各個部位，完成腫瘤的轉移過程。
　　 血管內皮生長因子(VEGF)是血管生成的強促進劑，而Caveolin-1可能是血管生成促進劑和抑制劑作用的共同靶點，Caveolin-1在

6、VEGF/VEGFR2調節(jié)血管生成中起關鍵作用。關于Caveolin-1、VEGF在宮頸癌組織中的表達是否具有相關性，目前國內外仍無報道。
　　 本實驗通過應用免疫組織化學方法檢測Caveolin-1、VEGF在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、宮頸上皮內瘤變(CIN)及浸潤性宮頸癌(ICC)Ⅰ、Ⅱ期中的表達水平，進一步分析浸潤性宮頸癌(ICC)Ⅰ、Ⅱ期的患者癌組織中Caveolin-1、血管內皮生長因子(VEGF)的表達水平與臨床病理

7、學參數(shù)之間的關系，探討Caveolin-1與血管內皮生長因子(VEGF)的關系及在宮頸癌轉移中的地位，對進一步尋找宮頸癌早期診斷的有用的生物標志物，進一步了解宮頸癌惡性轉化及浸潤、轉移的分子機制提供理論依據(jù)，也為宮頸癌的靶向治療提供新思路。
　　 [方法]
　　 回顧性分析2008年1月—2012年2月，南方醫(yī)科大學附屬萍鄉(xiāng)醫(yī)院婦產科門診就診或收住入院的宮頸疾病患者的臨床病理資料，均因為各種類型的子宮頸良惡性病變接受了相

8、應的手術，術后石蠟包埋組織標本保存在我院病理科，共130例。病例被分為5組:其中慢性宮頸炎組，共40例;CINⅠ/Ⅱ組，共30例，其中CINⅠ12例和CINⅡ18例;CINⅢ組，共20例;浸潤性宮頸癌組，共40例，其中包括Ⅰ期21例和Ⅱ期19例。并以同期因“子宮肌瘤”在我院需行全子宮切除術病例的正常子宮頸組織30例為對照組，通過應用免疫組織化學SP法檢測正常宮頸組織、慢性宮頸炎、宮頸上皮內瘤變(CIN)和及浸潤性宮頸癌(ICC)Ⅰ、Ⅱ期

9、中的石蠟標本中的Caveolin-1和血管內皮生長因子(VEGF)的表達水平。用已知結腸癌陽性標本做陽性對照，以PBS代替一抗作陰性對照，來進行Caveolin-1、血管內皮生長因子(VEGF)免疫組織化學著色結果判定，整理數(shù)據(jù)及病理資料。利用SPSSI3.0軟件包進行統(tǒng)計分析，采用卡方檢驗或Fisher確切概率法分析各指標在宮頸不同病變組織中表達的差異性;用卡方檢驗或Fisher確切概率法分析各指標與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的相關性，并

10、進一步用logistic回歸分析篩選各參數(shù)指標與表達陽性的相關因素;各指標相關分析采用卡方檢驗并計算列聯(lián)系數(shù);P＜0.05有統(tǒng)計學意義。
　　 [結果]
　　 1、Caveolin-1蛋白在宮頸組織中的陽性著色定位于細胞胞膜及胞漿，其陽性表達呈棕黃色或棕褐色顆粒。Caveolin-1蛋白在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ及浸潤性宮頸癌組織中的陽性表達率呈漸進性降低，分別為100.00％(30/30)、95

11、％(38/40)、83.33％(25/30)、75.00％(15/20)和72.50％(29/40)，五組之間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);正常宮頸組織組、慢性宮頸炎組、CINⅠ/Ⅱ組、CINⅢ組與浸潤性宮頸癌組織組之間兩兩比較，正常宮頸組織組與浸潤性宮頸癌組比較有顯著性差異(P＜0.0125)，其余各組之間無明顯差異(P＞0.0125)（見表3.1）;宮頸癌中Caveolin-1蛋白表達與年齡、FIGO臨床分期無相關，無統(tǒng)計學意義

12、(P＞0.05)(見表3.2);Caveolin-1蛋白的表達與腫瘤大小、病理分級、浸潤深度、區(qū)域淋巴結轉移均相關(P＜0.05)（見表3.2），再進一步經Logistic逐步回歸分析得出，Caveolin-1蛋白的表達與腫瘤大小、浸潤深度、區(qū)域淋巴結轉移均相關，其中腫瘤越大，蛋白陽性表達越低(OR=0.052，P＜0.05);腫瘤侵犯越深，蛋白陽性表達越低(OR=0.044，P＜0.05);有淋巴轉移者的表達低于無淋巴轉移者（OR=0

13、.037，P＜0.05）（見附表3.2）。
　　 2、血管內皮生長因子(VEGF)在宮頸組織中的陽性著色主要定位于胞漿，其陽性表達呈棕黃色或棕褐色顆粒，表達陽性細胞的分布呈局灶性和彌漫性。VEGF蛋白在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ及浸潤性宮頸癌組織中的陽性表達率呈漸進性增高，分別為10.00％(3/30)、15.00％(6/40)、26.67％(8/30)、45.00％(9/20)和70.00％(28/40)

14、，五組之間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ與浸潤性宮頸癌組織之間兩兩比較，CINⅢ與浸潤性宮頸癌組之間其表達無差異(P＞0.0125)，其余各組與浸潤性宮頸癌組之間有明顯差異(P＜0.0125)（見表3.3）;浸潤性宮頸癌中VEGF蛋白表達與腫瘤大小、年齡、FIGO臨床分期無相關，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)(見表3.4);VEGF蛋白的表達與病理分級、浸潤深度、區(qū)域淋巴結轉移均密切相關

15、(P＜0.05)（見表3.4），再進一步經Logistic逐步回歸分析得出，VEGF蛋白表達與病理分級、淋巴結轉移有關，病理分級越高，蛋白陽性表達越低(OR=0.156P＜0.05);有淋巴結轉移者的表達高于無淋巴結轉移者(OR=0.024，P＜0.05)。（見附表3.4）
　　 3、浸潤性宮頸癌及宮頸上皮內瘤變Ⅲ級中Caveolin-1蛋白與VEGF蛋白表達之間呈負相關關系(P＜0.05)(表3.5);CINⅢ中Caveoli

16、n-1蛋白與VEGF蛋白表達兩者之間呈負相關的關系(P＜0.05)(表3.6);CINⅠ/Ⅱ組中Caveolin-1蛋白與VEGF蛋白表達兩者之間無相關(P＞0.05)（表3.7）;慢性宮頸炎組中Caveolin-1蛋白與VEGF蛋白表達兩者之間無相關(P＞0.05)（表3.8）.
　　 [結論]
　　 1、Cavcolin-1蛋白在正常宮頸組織組、慢性宮頸炎組、CINⅠ/Ⅱ組、CINⅢ組及浸潤性宮頸癌組織組中的表達均呈

17、漸進性降低，Caveolin-1蛋白在宮頸癌中的表達與腫瘤大小、浸潤深度、區(qū)域淋巴結轉移均密切相關，提示其表達的降低是宮頸癌發(fā)生中的早期事件，可能參與了宮頸癌的發(fā)展過程，是早期識別具有高度浸潤和轉移潛能宮頸癌的重要指標，也是判斷預后的一個重要指標。
　　 2、血管內皮生長因子(VEGF)在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ及浸潤性宮頸癌組織中的表達呈漸進性增高，血管內皮生長因子(VEGF)在宮頸癌中的表達與病理分級