妊娠糖尿病孕婦血清Exosome中miRNA的表達(dá)譜分析.pdf

1、妊娠糖尿病(Gestational diabetes mellitus，GDM)是目前常見的妊娠期綜合征之一，主要癥狀出現(xiàn)在妊娠后期，臨床癥狀有孕婦體重過重，外陰、陰道假絲酵母菌感染反復(fù)發(fā)作等，妊娠糖尿病早期可以通過合理飲食和適當(dāng)運(yùn)動(dòng)控制治療，但目前妊娠糖尿病篩查在孕中后期，致使患病孕婦沒有足夠時(shí)間介入治療，妊娠糖尿病早期診斷分子標(biāo)記物的研究發(fā)現(xiàn)迫在眉睫。miRNA由于其高度穩(wěn)定性，物種間序列的保守性和表達(dá)的時(shí)空特異性，成為生物標(biāo)記物的

2、研究熱點(diǎn)。miRNA是一種內(nèi)源性的非編碼RNA，通過與靶mRNA的3'端互補(bǔ)配對(duì)實(shí)現(xiàn)對(duì)基因的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，研究發(fā)現(xiàn)某些miRNA的異常表達(dá)與妊娠糖尿病相關(guān)，但研究方法僅限于低密度芯片，定量PCR等，近年來發(fā)展起來的高通量測(cè)序技術(shù)由于數(shù)據(jù)量大，信息全面等特點(diǎn)在miRNA的研究中具有更大的優(yōu)勢(shì)。Exosome是在內(nèi)吞作用下由各種細(xì)胞釋放到細(xì)胞外基質(zhì)的直徑為40-100nm的膜泡結(jié)構(gòu)，其中包裹了各類蛋白、RNA、脂質(zhì)體等。基于Exosome的膜

3、泡結(jié)構(gòu)，Exosome中的miRNA更加穩(wěn)定，能夠更好的表征疾病的特征。鑒于以上背景我們對(duì)血清Exosome中的miRNA和血清中游離的miRNA進(jìn)行了高通量測(cè)序研究，并且檢測(cè)分析了妊娠糖尿病孕婦與正常孕婦Exosomal miRNA的表達(dá)譜差異情況。該論文主要完成了如下研究?jī)?nèi)容:
　　1、血清及其Exosome中miRNA的表達(dá)譜檢測(cè)分析:論文首先對(duì)血清中游離miRNA和Exosome中miRNA表達(dá)譜的進(jìn)行了高通量測(cè)序分析，其

4、中Exosomal miRNA的測(cè)序結(jié)果比普通的血清miRNA測(cè)序結(jié)果更加豐富。血清Exosome中不但獲得了更多的miRNA種類;而且在高豐度miRNA的表達(dá)上，其表達(dá)水平更高;差異表達(dá)分析顯示除少數(shù)miRNA外，絕大多數(shù)miRNA在血清和血清e(cuò)xosome中沒有表現(xiàn)出顯著的差異。從中我們可以進(jìn)一步證實(shí)血清中的miRNA在exosome中更加穩(wěn)定，exosomal miRNA能夠更好的表征樣本中的miRNA差異，可以作為潛在的生物標(biāo)志

5、物進(jìn)行研究與應(yīng)用。
　　2、妊娠糖尿病孕婦血清Exosomal miRNA的差異表達(dá)分析:我們利用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)妊娠糖尿病孕婦和健康孕婦血清e(cuò)xosome中的miRNA進(jìn)行了表達(dá)差異分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有28種差異表達(dá)的miRNA，其中16種表達(dá)上調(diào)，12種表達(dá)下調(diào)，其中miR-19b-3p、miR-19a-3p、miR-16-5p、let-7f-5p、miR-18a-5p五種miRNA均為高豐度表達(dá)，而且差異極顯著。對(duì)他們進(jìn)行靶基因

6、預(yù)測(cè)和功能富集分析結(jié)果顯示這些miRNA主要靶向INRS、IRS1/2、SOCS、P13k、ERK1/2，與Ⅱ型糖尿病信號(hào)通路、胰島素信號(hào)通路和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)信號(hào)通路密切相關(guān)，提示其與妊娠糖尿病的發(fā)生發(fā)展存在相關(guān)性，為妊娠糖尿病的診治提供了新的靶標(biāo)分子。
　　3、結(jié)論:本論文在利用高通量測(cè)序血清及血清e(cuò)xosome miRNA進(jìn)行檢測(cè)分析的基礎(chǔ)上，對(duì)妊娠糖尿病孕婦血清e(cuò)xosome miRNA進(jìn)行了差異表達(dá)分析，獲得了一些差異表達(dá)的