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文檔簡介
1、目的:通過給予懷孕16天左右的C57BL/6母鼠吸入濃度相對較高的氧氣,觀察新生幼鼠視網(wǎng)膜血管的發(fā)育狀態(tài)和生長情況,研究圍生期的孕婦經(jīng)過高濃度氧氣治療與新生兒視網(wǎng)膜病變的關(guān)系,擬建立新型高濃度氧誘導(dǎo)的早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)動物模型。
方法:選擇40只孕齡約16天左右的C57BL/6孕鼠隨機(jī)分為四組,每組10只,對照組:10只孕鼠飼養(yǎng)于空氣中,實(shí)驗(yàn)組1組:10只孕齡16日的孕鼠飼養(yǎng)于75%氧箱中,待小鼠出生后,即刻停止通氧,將母
2、鼠同新生鼠一同置于空氣飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)組2組:10只孕鼠生產(chǎn)前置于空氣中飼養(yǎng),待孕鼠產(chǎn)仔后,立即將母鼠新生鼠一同置于密閉的75%氧箱中,7天后改為空氣飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)3組:10只孕齡16日的孕鼠飼養(yǎng)于75%氧箱中,待新生鼠鼠齡為7日時,將母鼠同新生鼠一同置于空氣飼養(yǎng)。分別行視網(wǎng)膜鋪片聯(lián)合免疫熒光了解視網(wǎng)膜血管的改變,眼球組織石蠟切片HE染色后,計數(shù)突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù),免疫組化法觀察視網(wǎng)膜各層血管內(nèi)皮生長因子(vascular end
3、othelial growth factor,VEGF)和轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表達(dá)。
結(jié)果:1.眼球石蠟切片HE染色突破內(nèi)界膜細(xì)胞計數(shù)統(tǒng)計,對照組突破內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細(xì)胞計數(shù)為(1.30±1.10)個,實(shí)驗(yàn)組1組,2組,3組分別為(8.53±5.00)個,(9.34±6.80)個,(18.20±11.60)個。對照組和實(shí)驗(yàn)組比較P<0.05;實(shí)驗(yàn)1組和實(shí)
4、驗(yàn)2組比較,P>0.05,無統(tǒng)計學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)3組與實(shí)驗(yàn)1組,2組對比,P<0.05,有明顯統(tǒng)計學(xué)差異;
2.石蠟切片免疫組化顯示:對照組VEGF和TGF-β1陽性樣本積分光密度分別為(70.89±61.94),(25.34±11.23);與實(shí)驗(yàn)組相比較,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)1組與實(shí)驗(yàn)2組,3組相比較,P<0.05,有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)2組和3組相比,P>0.05,無明顯統(tǒng)計學(xué)差異;
3.視網(wǎng)膜鋪片示:對
5、照組和實(shí)驗(yàn)組比較P<0.05;實(shí)驗(yàn)1組和實(shí)驗(yàn)2組.實(shí)驗(yàn)3組比較,P<0.05,無統(tǒng)計學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)3組與實(shí)驗(yàn)2組對比,P>0.05,無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。
結(jié)論:1.孕鼠吸入高濃度氧可能誘發(fā)早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜新生血管化和纖維增殖化,符合早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變的病理機(jī)制。
2.此種高濃度氧是一種合理的誘導(dǎo)方法,能有效的引起早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變,科學(xué)的構(gòu)建早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?br> 3.孕婦圍生期吸入高濃度氧可能會誘發(fā)或?qū)е略绠a(chǎn)兒
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