不同中藥對青霉素致癇大鼠干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)觀察.pdf

1、目的：癲癇是大腦神經(jīng)元異常同步放電引起的以短暫中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失調(diào)為特征的慢性腦部疾病，嚴(yán)重危害人類健康。無論單獨(dú)或聯(lián)合用藥，目前抗癲癇藥物治療僅能使80％癲癇患者緩解，仍有20％患者因耐藥或西藥的嚴(yán)重副作用而未能有效控制，因此開發(fā)新的無毒副作用的抗癲癇藥物迫在眉睫。隨著新型抗癲癇西藥研發(fā)步伐的放慢，且抗癲癇西藥的副作用也已逐漸被重視，人們將目光投向了抗癲癇中藥的研發(fā)上。臨床研究證實(shí)，天麻、石菖蒲、胡椒、全蝎及蜈蚣均具有抗癲癇作用，且長

2、期使用無明顯毒副作用，但其作用機(jī)制尚不完全明確。本實(shí)驗(yàn)采用青霉素致癇大鼠模型，觀察以上中藥對模型大鼠的行為學(xué)、驚厥潛伏期及海馬組織的GABA能神經(jīng)元、尼氏小體的影響，探討它們的抗癲癇機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 方法：健康成年雄性SD大鼠(250g左右)，隨機(jī)分成八組：即正常對照組、青霉素致癇大鼠模型組(簡稱模型組)、丙戊酸鈉組、天麻組、石菖蒲組、胡椒組、全蝎組及蜈蚣組，每組8只大鼠。后6組于腹腔注射青霉素(8×106u/kg

3、)復(fù)制癲癇模型前給予藥物(臨床常用劑量灌胃)干預(yù)15天，然后觀察癲癇大鼠的行為及癇性發(fā)作潛伏期(以造模至首次出現(xiàn)濕狗樣抖動的時間計算癇性發(fā)作潛伏期)的改變。部分大鼠于造模2h后斷頭取腦，對大鼠海馬組織進(jìn)行HE染色、Nissl染色和GABA免疫組化染色，計算高倍鏡下免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞百分率(陽性細(xì)胞百分率(％)=免疫組化顯色陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)/所觀察視野相關(guān)細(xì)胞總數(shù)×100％)及免疫陽性細(xì)胞評分(Immunes Histochemistry P

4、ositive Cell Score，IHS)值。 結(jié)果： 1. 行為學(xué)改變：造模前大鼠活動靈活，飲食正常，反應(yīng)敏捷，皮毛純白光滑。腹腔注射青霉素后，動物逐漸變得安靜，隨后出現(xiàn)眼神呆滯、呼吸加快，繼而出現(xiàn)點(diǎn)頭，頭部肌群抖動，或身體突然出現(xiàn)一下抽動。模型組大鼠癇性發(fā)作潛伏期為38.45±3.05min，丙戊酸鈉組大鼠為87.48±2.99min，天麻組為65.15±2.07min，石菖蒲組為60.87±2.47 min，胡

5、椒組為45.73±1.84min，全蝎組為74.34±1.24min，蜈蚣組為79.64±1.64 min，兩兩比較后差別均有統(tǒng)計學(xué)意義。 2. 腦電圖變化：正常對照組大鼠腦電圖以8-10HZ的α波為主要表現(xiàn)，無明顯陣發(fā)性節(jié)律出現(xiàn)，波幅<50uv；模型組大鼠腦電圖明顯異常放電，表現(xiàn)為高幅尖波、棘波或棘慢綜合波，說明青霉素誘導(dǎo)的大鼠癲癇模型成功。各藥物組大鼠腦電圖癇性放電較模型組有所減弱，表現(xiàn)為波幅降低、癲癇波減少。 3.

6、 病理學(xué)變化： 3.1 HE染色：正常對照組大鼠海馬CA3、CA1區(qū)、齒狀回神經(jīng)元排列整齊，極向好，染色均勻。模型組、藥物組大鼠海馬CA3、CA1區(qū)及齒狀回門區(qū)神經(jīng)元數(shù)量減少，排列紊亂，極向不清。 3.2 Nissl染色：正常對照組大鼠海馬神經(jīng)元胞漿內(nèi)可見藍(lán)色的塊狀或顆粒狀的尼氏小體，且數(shù)量多，染色深；模型組與藥物組大鼠海馬區(qū)的神經(jīng)元胞漿內(nèi)尼氏小體數(shù)量少，染色淡，呈現(xiàn)不同程度的溶解。大鼠海馬尼氏小體染色I(xiàn)HS值：正常對照

7、組為2.08±0.04，模型組為0.57±0.03，丙戊酸鈉組為1.57±0.02，天麻組為1.31±0.02，石菖蒲組為1.37±0.03，胡椒組為0.734±0.03，全蝎組為1.39±0.02，蜈蚣組為1.26±0.03。石菖蒲組大鼠與全蝎組比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義，石菖蒲組或全蝎組及其他各組大鼠兩兩比較，差別均有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.3 GABA免疫組化染色：正常組大鼠海馬GABA免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞形態(tài)完整，排列密集，而模型組及

8、藥物組大鼠海馬GABA免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞排列稀疏，并有不同程度的損傷。大鼠海馬GABA免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞百分率：正常對照組為0.76±0.03，模型組為0.19±0.03，丙戊酸鈉組為0.66±0.03，天麻組為0.49±0.02，石菖蒲組為0.44±0.02，胡椒組為0.31±0.02，全蝎組為0.54±0.03，蜈蚣組為0.55±0.03。全蝎組與蜈蚣組大鼠比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義；全蝎組或蜈蚣組及其他各組大鼠兩兩比較，差別均有統(tǒng)計學(xué)意義

9、。 結(jié)論： 1. 成功復(fù)制了青霉素誘發(fā)的急性癲癇大鼠模型。 2. 天麻、石菖蒲、胡椒、全蝎及蜈蚣等五味中藥均有抗癲癇作用，但作用比丙戊酸鈉弱。 3. 五味中藥中以蜈蚣的抗癲癇作用最強(qiáng)，其次為全蝎，而胡椒的抗癲癇作用最弱。 4. 天麻、石菖蒲、全蝎、蜈蚣等四味中藥抗癲癇作用，可能是通過GABA能抑制系統(tǒng)及其他途徑實(shí)現(xiàn)的；而胡椒的抗癲癇作用是主要通過增加單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、降低興奮性氨基酸水平等途徑實(shí)現(xiàn)的