中藥中桔青霉素檢測(cè)方法的研究.pdf

1、桔青霉素(Citrinin)是青霉屬(Penicillium)、曲霉屬(Aspergillus)、紅曲霉屬(Monascus)中的絲狀霉菌代謝產(chǎn)生的一種真菌毒素,在自然界中分布極其廣泛。桔青霉素有致畸、致癌、致突變的潛在危害,而且還與某些地方性疾病的發(fā)生有密切聯(lián)系,對(duì)人畜健康的危害十分嚴(yán)重。鑒于桔青霉素在食品、農(nóng)產(chǎn)品中的普遍性和危害性,特別是近年來(lái)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上紅曲產(chǎn)品中桔青霉素的污染普遍性,大大影響了人們的身體健康和紅曲產(chǎn)品的出口貿(mào)易,因

2、此應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)紅曲產(chǎn)品中桔青霉素檢測(cè)方法的建立和相關(guān)限量標(biāo)準(zhǔn)的完善,以保證食品安全。此外,應(yīng)當(dāng)重視的是,傳統(tǒng)藥用植物與農(nóng)產(chǎn)品、飼料相比,在生長(zhǎng)、收獲、運(yùn)輸和貯藏期間同樣存在被產(chǎn)毒霉菌污染的可能性,因此很有必要建立一套中藥中桔青霉素的檢測(cè)方法,制訂其合理的限量標(biāo)準(zhǔn),以保證中藥的安全有效。國(guó)內(nèi)外對(duì)桔青霉素建立了多種檢測(cè)分析方法,但這些分析方法只限于對(duì)食品、農(nóng)產(chǎn)品以及飼料中毒素的分析,對(duì)中藥中桔青霉素的分析,涉及還比較少。本文建立了紅曲產(chǎn)品以及

3、中藥中桔青霉素的檢測(cè)方法。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下:
　　 1、建立了紅曲及其制品中桔青霉素的高效液相色譜檢測(cè)方法及質(zhì)譜確證方法,并對(duì)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上紅曲樣品進(jìn)行了污染狀況調(diào)查。
　　 紅曲樣品經(jīng)甲醇-水(70:30,v／v)混合溶劑提取,通過(guò)桔青霉素免疫親和柱(IAC)凈化,采用HPLC-FLD測(cè)定,并對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行LC-MS／MS確證。該法檢測(cè)限為0.8μg／kg,線形范圍為0.1-1000 ng／mL,在25—200μg／

4、kg添加水平下,回收率范圍在73.4％-89.4％,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為2.1％-7.9％。對(duì)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上59批紅曲樣品進(jìn)行了分析測(cè)定,調(diào)查顯示其中有29批樣品檢測(cè)為陽(yáng)性,污染水平為16.62-5252.90μg／kg,該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、可靠,可用于紅曲及其制品中桔青霉素的檢測(cè)分析。
　　 2、建立了中藥材及其制品中桔青霉素的高效液相色譜檢測(cè)方法,并對(duì)國(guó)內(nèi)中藥市場(chǎng)的中藥樣品進(jìn)行了污染狀況調(diào)查。
　　 中藥樣品經(jīng)甲醇-水(70

5、:30,v／v)混合溶劑提取,通過(guò)桔青霉素免疫親和柱(IAC)凈化,采用HPLC-FLD測(cè)定。該法檢測(cè)限為0.8μg／kg,在25-200μg／kg添加水平下,不同基質(zhì)中藥的回收率范圍在79.2％-92.5％,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍1.4％-4.8％。對(duì)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上50批中藥樣品進(jìn)行了分析測(cè)定,在該檢測(cè)限以上沒(méi)有樣品含有桔青霉素。該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、可靠,可用于中藥中桔青霉素的檢測(cè)分析。
　　 3、建立了中藥中桔青霉素的高效液相色譜-串聯(lián)

6、質(zhì)譜檢測(cè)方法。
　　 樣品經(jīng)甲醇-水(70:30,v／v)混合溶劑提取后,通過(guò)桔青霉素免疫親和柱(IAC)凈化,采用LC-MS／MS法測(cè)定中藥中的桔青霉素。質(zhì)譜采用電噴霧電離(ESI),多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方式分別監(jiān)測(cè)離子對(duì)m／z251→m／z233(桔青霉素)和m／z472→m／z436(內(nèi)標(biāo)特非那定)。以桔青霉素和內(nèi)標(biāo)特非那定峰面積的比值對(duì)桔青霉素的濃度作線性回歸,桔青霉素在0.1-50 ng／mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,日