大豆（Glycine max）細(xì)胞質(zhì)雄性不育系線粒體基因組的RAPD分析.pdf

1、植物雄性不育是植物界普遍存在的現(xiàn)象，它是利用雜種優(yōu)勢生產(chǎn)雜交種的基礎(chǔ)，可以省去人工去雄，達(dá)到降低成本的目的。到目前為止，大豆已選育十幾個(gè)不同且育性穩(wěn)定的質(zhì)核互作雄性不育系，并已初步實(shí)現(xiàn)利用雜種優(yōu)勢獲得大豆產(chǎn)量上的突破，但對(duì)大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育分子機(jī)理的研究還是較少。為此，本文以62對(duì)大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育系及相應(yīng)保持系為材料，采用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)mtDNA基因組進(jìn)行標(biāo)記和多態(tài)性分析，并對(duì)獲得的部分不育系和保持系特異譜帶進(jìn)行測序分析。

2、 主要研究結(jié)果如下： 1．設(shè)置5個(gè)蔗糖梯度(30％，35％，40％，45％，50％)再經(jīng)兩次超速離心(35000rpm)分離線粒體可以保證分離到線粒體DNA的純度，從而確保線粒體DNA的提取質(zhì)量。 2．OPA-03、OPD-20、OPE-01、OPG-17、OPH-18、OPK-07、OPM-06、OPP-15、OPQ-12、OPQ-13、OPR-03等11個(gè)引物在保持系中擴(kuò)增出特異產(chǎn)物，OPD-02、OPL-13、

3、OPN-03等3個(gè)引物在不育系中擴(kuò)增出特異產(chǎn)物，OPB-06、OPI-09、OPL-10等3個(gè)引物在保持系和不育系上均擴(kuò)增出特異產(chǎn)物，但片段大小不同。這些特異的存在可能與大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育的產(chǎn)生有關(guān)。 3．對(duì)上述擴(kuò)增獲得的部分目的片段(8個(gè))進(jìn)行了測序，除OPN-03擴(kuò)增的特異片段為未知序列外，其它7個(gè)擴(kuò)增的特異序列均與植物線粒體基因組都具有較高的同源性。這也進(jìn)一步說明我們提取的線粒體DNA純度較高。 4．引物OPA-0