川芎嗪對(duì)急性肺血栓栓塞癥大鼠細(xì)胞因子的影響及肺栓塞臨床病例分析.pdf

1、目的：肺血栓栓塞癥是由來(lái)自靜脈系統(tǒng)或右心的血栓阻塞肺動(dòng)脈或其分支所致疾病，以肺循環(huán)和呼吸功能障礙為其主要臨床和病理生理特征。PTE發(fā)病率高，病死率高，漏診誤診率高，目前已成為重要的醫(yī)療保健問(wèn)題。對(duì)它的認(rèn)識(shí)尚需進(jìn)一步提高，其發(fā)病機(jī)制及治療尚需進(jìn)一步探索。有鑒于此，我們采用自體血栓回輸法建立大鼠急性肺血栓栓塞癥模型，探討較長(zhǎng)時(shí)間下大鼠一般情況、動(dòng)脈血?dú)夥治鲋笜?biāo)，血中及肺組織中相關(guān)細(xì)胞因子的變化。并給予一定劑量的中藥川芎嗪干預(yù)，觀察它對(duì)上述指

2、標(biāo)的影響，進(jìn)一步探究這些細(xì)胞因子在PTE發(fā)病機(jī)制中的作用，并為PTE的臨床治療提供一定的理論基礎(chǔ)。 方法：65只健康SD大鼠，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、PTE模型組及川芎嗪治療組。模型組僅建立PTE模型。川芎嗪治療組是在PTE模型成功基礎(chǔ)上，每只加用川芎嗪注射液2mg/d每日一次腹腔注射治療?？瞻讓?duì)照組5只大鼠，模型組及川芎嗪治療組分為術(shù)后或注射1小時(shí)、3小時(shí)、1天、3天、5天和7天六個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只大鼠。PTE模型采用自體血

3、栓回輸法建立，在大鼠尾靜脈取血0.2ml，制成栓子，經(jīng)頸靜脈注入右心。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀察動(dòng)物的一般情況，處死動(dòng)物，抽出動(dòng)脈血進(jìn)行血?dú)夥治?，抽血分離血漿采用放射免疫法測(cè)定血漿中TXB2和6-K-PGF1α濃度。分離肺組織，常規(guī)HE染色觀察各組病理變化。應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈霉素抗生物素蛋白-生物素免疫染色(S-P)法檢測(cè)各組肺組織中ET-1、COX-2及CD54的表達(dá)情況。運(yùn)用RT-PCR及Western-blot方法分別檢測(cè)各組肺組織中HIF

4、-1αmRNA及ERK1/2表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)一般情況：模型組較空白對(duì)照組差，呼吸頻率加快，口唇發(fā)紺明顯。川芎嗪治療組情況好轉(zhuǎn)。(2)血?dú)夥治鼋Y(jié)果：模型組存在一定程度的酸中毒，二氧化碳分壓降低，低氧血癥(P＜0.05)。川芎嗪治療7天后，血?dú)饨Y(jié)果各項(xiàng)指標(biāo)基本恢復(fù)正常(P＞0.05)。(3)血漿中TXB2和6-K-PGF1α濃度及兩者比值(T/P)：模型組血漿TXB2濃度逐漸增高，顯著高于空白對(duì)照組(P＜0.05)，川芎嗪治

5、療組治療前期也增高，高于空白對(duì)照組(P＜0.05)。5天后降低至與空白對(duì)照組接近(P＞0.05)；模型組和川芎嗪治療組6-酮-PGF1α濃度均高于空白對(duì)照組(P＜0.05)；TXB2/6-酮-PGF1α比值(T/P)模型組明顯隨時(shí)間逐漸增高，明顯高于空白對(duì)照組(P＜0.05)，川芎嗪治療組和空白對(duì)照組相比基本相近(P＞0.05)。(4)大體標(biāo)本及常規(guī)HE染色：大體標(biāo)本觀察空白對(duì)照組可見(jiàn)肺組織顏色鮮紅，表面光滑，無(wú)水腫出血；模型組可見(jiàn)肺膨

6、脹不全及多個(gè)片狀面積大小不等暗紅色散在出血灶；川芎嗪治療組出血水腫好轉(zhuǎn)，肺組織形態(tài)恢復(fù)正常。常規(guī)HE染色顯微鏡下空白對(duì)照組見(jiàn)肺泡結(jié)構(gòu)清楚、肺動(dòng)脈內(nèi)無(wú)血栓、肺泡間隔完整、無(wú)水腫出血；模型組可見(jiàn)肺動(dòng)脈內(nèi)多處血栓，肺泡壁和間質(zhì)增厚，其內(nèi)可見(jiàn)大量白細(xì)胞浸潤(rùn)和炎性滲出；肺泡內(nèi)可見(jiàn)大量滲出液和紅細(xì)胞。川芎嗪治療組治療后與模型組相比血栓明顯消失，炎性反應(yīng)及出血水腫明顯減輕，肺泡間隔恢復(fù)正常。(5)ET-1、COX-2及CD54表達(dá)情況：各指標(biāo)表達(dá)情況

7、模型組均較對(duì)照組明顯增高(P＜0.05)；而川芎嗪治療組治療5-7天后，各指標(biāo)大體恢復(fù)正常，與對(duì)照組組類(lèi)似(P＞0.05)。而且川芎嗪治療組第7天數(shù)值明顯低于模型組各值(P＜0.05)。(6)HIF-1αmRNA表達(dá)情況：在空白對(duì)照組，HIF-1αmRNA表達(dá)較低。模型組均有HIF-1αmRNA表達(dá)，1h，3h，1d表達(dá)較弱(P＞0.05)，3d后表達(dá)逐漸增強(qiáng)(P＜0.05)。川芎嗪治療組HIF-1αmRNA表達(dá)較弱，與空白對(duì)照組接近(

8、P＞0.05)。川芎嗪治療組第7天數(shù)值明顯低于模型組第5天及第7天數(shù)值(P＜0.05)。(7)ERK1/2表達(dá)情況：在空白對(duì)照組，ERK1/2蛋白表達(dá)較低。模型組表達(dá)較空白對(duì)照組明顯增強(qiáng)(P＜0.05)。而川芎嗪治療組ERK1/2蛋白水平也比空白對(duì)照組明顯增高(P＜0.05)，但較模型組明顯降低，第7天數(shù)值與模型組各值相比有顯著性差異(P＜0.05)。 結(jié)論：本試驗(yàn)研究表明這些細(xì)胞因子參與了PTE的病理生理變化，是PTE的發(fā)病機(jī)