電針關(guān)元穴對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　觀察電針關(guān)元穴對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松癥大鼠骨形成的影響，從Wnt-β-catenin信號(hào)通路的相關(guān)因子探討電針關(guān)元穴調(diào)節(jié)骨形成的作用機(jī)制。
　　方法：
　　將4.5月齡SD雌性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、模型組(Ovx)、電針關(guān)元組(CV4)、電針非經(jīng)非穴組(Mock)，每組各10只。除假手術(shù)組外，各組大鼠均切除雙側(cè)卵巢(ovariectomy，OVx)制備絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型，假手術(shù)組僅切除卵巢周圍等量脂

2、肪組織。造模成功后，關(guān)元組和非經(jīng)非穴組每日電針1次，頻率為2Hz，強(qiáng)度為1mA，每次持續(xù)20min，10d為一個(gè)療程，療程間休息1天，共治療3個(gè)療程;模型組和假手術(shù)組不進(jìn)行針刺治療，只給予相同的套頭、抓取、固定操作，療程同針刺組。治療結(jié)束后，測(cè)定各組大鼠骨密度值;用HE染色法檢測(cè)大鼠左側(cè)股骨骨小梁的變化;運(yùn)用三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠右側(cè)股骨骨生物力學(xué)的變化;酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清堿性磷酸酶(ALP)、骨鈣素(BGP)的濃度;提取股骨骨組織m

3、RNA，用RT-PCR法檢測(cè)股骨細(xì)胞中Wnt3a，β-catenin和Runx2 mRNA的表達(dá);采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大鼠股骨Wnt3a，β-catenin蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.左股骨頭骨小梁彩色圖像觀察:和模型組相比較，電針關(guān)元穴能夠顯著改善模型大鼠骨小梁結(jié)構(gòu)松散、排列紊亂、密度降低的骨質(zhì)疏松形態(tài)學(xué)改變;非經(jīng)非穴組與模型組比較沒有明顯差異。
　　2.骨生物力學(xué)指標(biāo)與骨密度檢測(cè):電針關(guān)元穴組能改善股

4、骨最大載荷和斷裂載荷，并提高骨密度，與模型組比較均有顯著差異(P＜0.05);電針關(guān)元穴組與假手術(shù)組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異性（P＞0.05）;電針非經(jīng)非穴組與模型組比較無明顯差異（P＞0.05）。
　　3.血清ALP、BGP水平:電針關(guān)元穴組與模型組、非經(jīng)非穴組相比，ALP、BGP水平較高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P＜0.05）;電針非經(jīng)非穴組與模型組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異性（P＞0.05）。
　　4.RT-PCR法檢測(cè)Wnt3

5、a、β-catenin、Runx2基因表達(dá)結(jié)果:模型組大鼠中Wnt3a、β-catenin以及Runx2 mRNA表達(dá)明顯降低，和假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.05);電針關(guān)元穴組能夠顯著上調(diào)Wnt3a、β-catenin以及Runx2的表達(dá)，和模型組比較有顯著性差異(P＜0.05);電針關(guān)元穴組和假手術(shù)組比較無顯著差異（P＞0.05）。
　　5.免疫組化Wnt3a、β-catenin蛋白表達(dá)結(jié)果:電針關(guān)元穴能夠影響Wnt-β

6、-catenin通路中關(guān)鍵信號(hào)分子Wnt3a和β-catenin蛋白的表達(dá)，與模型組比較均有顯著差異(P＜0.05);電針關(guān)元穴組與假手術(shù)組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異性（P＞0.05）電針非經(jīng)非穴組沒有顯著改善上述蛋白的表達(dá)，與模型組比較統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異性（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　電針關(guān)元穴可以調(diào)節(jié)去卵巢骨質(zhì)疏松癥模型大鼠的骨形成，增強(qiáng)骨強(qiáng)度，且具有穴位特異性，其機(jī)理可能是激活了Wnt-β-catenin信號(hào)通路中