CD133+CXCR4+結(jié)直腸癌細胞對裸鼠肝轉(zhuǎn)移瘤形成的影響.pdf

1、目的：觀察人結(jié)腸癌細胞株HCT116中細胞表面分子CD133及CXCR4的表達情況，并通過建立動物模型探究結(jié)直腸癌CD133+CXCR4+腫瘤細胞的生物學(xué)特性及其在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中的作用。
　　方法：①應(yīng)用FACS檢測分析HCT116細胞系中CXCR4、CD133的表達情況并分選出CXCR4+CD133+、CXCR4-CD133-、CXCR4+CD133-、CXCR4-CD133+表型腫瘤細胞；取裸鼠24只，隨機分成4組，每組6只

2、，分別取5×105個上述四種表型腫瘤細胞通過裸鼠脾注射法建立動物模型。模型建立后觀察各組裸鼠一般情況，8周后處死裸鼠，觀察各組動物中脾原發(fā)瘤及肝轉(zhuǎn)移瘤的形成情況。②應(yīng)用FACS分選HCT116中的CD133+CXCR4+、CD133+CXCR4-表型腫瘤細胞,取雄性裸鼠18只，隨機分成3組，每組6只，并分別取5×105上述表型腫瘤細胞通過脾注射后脾切除法建立裸鼠術(shù)后肝轉(zhuǎn)移模型，具體分組如下：CD133+CXCR4+細胞+AMD3100實

3、驗組；CD133+CXCR4+細胞+PBS對照組；CD133+CXCR4-細胞+PBS對照組。實驗組術(shù)前2天至術(shù)后14天使用SDF-1/CXCR4軸阻斷劑AMD3100按2.5mg/kg劑量腹腔注射治療，每天兩次；對照組采用同劑量PBS治療。模型建立后觀察不同分組中裸鼠一般情況，45天后處死裸鼠觀察各組中肝轉(zhuǎn)移瘤的形成情況。
　　結(jié)果：1、HCT116細胞系可表達CD133、CXCR4表面分子物，且存在少量CD133+CXCR4+

4、表型腫瘤細胞；2、裸鼠脾注射模型實驗中，CXCR4+CD133+細胞組（6/6）較CD133+CXCR4-細胞組(5/6)的裸鼠脾臟原發(fā)成瘤率無差異（P>0.05），而較CD133-CXCR4+細胞組（1/6）及CD133-CXCR4-細胞組(0/6)間脾臟原發(fā)成瘤率高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；CD133+CXCR4-細胞組的裸鼠脾臟成瘤率較CD133-CXCR4-組高（P<0.05），且其成瘤率有高于 CD133-CXCR4

5、+組的趨勢（83.3&VS13.3％），但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。在肝臟轉(zhuǎn)移瘤形成方面，CD133+CXCR4+細胞組裸鼠肝轉(zhuǎn)移率高于CD133+CXCR4-細胞、CD133-CXCR4+細胞及CD133-CXCR4-細胞對照組（P<0.05），而三組對照組中裸鼠肝轉(zhuǎn)移率組間比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。3、SDF-1/CXCR4軸阻斷實驗中，CD133+CXCR4+細胞+PBS對照組裸鼠肝轉(zhuǎn)移瘤形成率（6/6）高于CD1

6、33+CXCR4+細胞+AMD3100治療組（1/6）及CD133+CXCR4-細胞+PBS治療組（0/6）（P<0.05），CD133+ CXCR4+細胞+AMD3100組（1/6）與CD133+CXCR4-細胞+PBS治療組（0/6）對比無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：（1）CD133+結(jié)直腸癌細胞可能具有腫瘤干細胞特性，且該表型細胞可表達CXCR4受體；（2）CD133+CXCR4+結(jié)直腸癌細胞具有轉(zhuǎn)移性腫瘤干細胞