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文檔簡介
1、EB病毒(Epstein—Barr virus,EBV)為自然界廣泛存在的皰疹病毒科DNA致瘤病毒,人群感染率高達90%以上。EBV除與人類多種淋巴系統(tǒng)腫瘤如伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤等的發(fā)生密切相關(guān),還與鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma NPC)、部分胃癌等上皮性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。近三十年來研究表明,世界范圍內(nèi)約10%的胃癌與EBV感染密切相關(guān),這部分胃癌稱為EB病毒相關(guān)胃癌(Epstein—Barr vir
2、us associated gastric carcinoma,EBVaGC)。 廣州地區(qū)是與EBV感染密切相關(guān)的鼻咽癌的高發(fā)區(qū),且該地區(qū)鼻咽癌組織中的EBV存在特殊的“f”型變異,研究發(fā)現(xiàn)該變異與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。此外,V—val型EBNA1變異也常見于廣州地區(qū)鼻咽癌組織中。那么,同是EBV相關(guān)上皮性腫瘤,在鼻咽癌高發(fā)區(qū)廣州地區(qū)的EBVaGC中的EBV變異情況怎樣?與該地區(qū)鼻咽癌中的EBV變異是否相同?與世界其他地區(qū)E
3、BVaGC中的EBV變異是否相同?目前未見文獻報道。 我們課題組前期對廣州地區(qū)EBVaGC的臨床病理特征和潛伏類型進行研究,共收集了676例普通胃癌和33例殘胃癌手術(shù)切除標本,用EBER原位雜交方法分別篩選出45例(6.7%)和9例(27.3%) EBVaGC;發(fā)現(xiàn)EBVaGC中EBV的潛伏類型為Ⅰ型,與鼻咽癌中的潛伏類型(Ⅱ型)不同。提示EBV在致胃癌和鼻咽癌機制上可能有所不同。本課題擬在此基礎(chǔ)上,進一步用PCR—RFLP和D
4、NA測序相結(jié)合的方法,研究廣州地區(qū)EBVaGC的病毒基因組多態(tài)性,并與廣州地區(qū)鼻咽癌和世界其他地區(qū)EBVaGC中的情況相比較,為進一步闡明EBV致上皮癌變的機制打下基礎(chǔ)。 本課題分為以下三部分: 第一部分普通胃癌中EBVaGC病毒分型和變異 [目的] 研究廣州地區(qū)普通胃癌中EBVaGC的病毒分型和變異,并與該地區(qū)鼻咽癌和世界其他地區(qū)EBVaGC中的情況相比較,幫助闡明EBV致上皮癌變的機制。 [材
5、料和方法] 采用PCR—RFLP和DNA測序相結(jié)合的方法,擴增五個不同的EBV基因片段,研究課題組已收集的45例廣州地區(qū)普通胃癌EBVaGC中的EBV分型和變異,統(tǒng)計分析不同EBV亞型或變異型所占的比例。 [結(jié)果] 五個EBV基因片段在45例普通胃癌EBVaGC標本中均擴增成功;EBV分型以A型病毒株為主(44/45,97.8%);變異型以“F”型、“I”型、“XhoI—”型、“del—LMP1”型為主,分別占8
6、2.2%(37/45)、100%(45/45)、75.6%(34/45)和93.3%(42/45)。 [結(jié)論] 廣州地區(qū)EBVaGC中EBV以“F”型變異為主,與該地區(qū)鼻咽癌中EBV以“f”型變異為主明顯不同;在EBV BamHI W1/I1交界區(qū)存在一個熱點突變(149,972 T→C),該突變在鼻咽癌中不存在;提示EBV在EBVaGC和鼻咽癌中的致病機制可能是不同的。 第二部分殘胃癌中的EBVaGCU病毒分型
7、和變異 [目的] 研究廣州地區(qū)殘胃癌中EBVaGC的病毒分型和變異,并與普通胃癌中的情況相比較,幫助闡明EBV致上皮癌變的機制。 [材料和方法] 采用PCR—RFLP和DNA測序相結(jié)合的方法,擴增五個不同的EBV基因片段,研究課題組已收集的9例廣州地區(qū)殘胃癌EBVaGC中的EBV分型和變異,統(tǒng)計分析不同EBV亞型或變異型所占的比例,并與普通胃癌EBVaGC中的情況相比較。 [結(jié)果] 五個E
8、BV基因片段在9例殘胃癌EBVaGC標本中均擴增成功;EBV分型以A型病毒株為主(8/9,88.9%);變異型以“F”型、“I”型、“XhoI—”型、“del—LMP1”型為主,分別占88.9%(8/9)、100%(9/9)、55.6%(5/9)和88.9%(8/9)。 [結(jié)論] 殘胃癌中EBVaGC的EBV分型和變異與普通胃癌中EBVaGC的EBV分型和變異相似,而殘胃癌中EBVaGC的比例明顯高于普通胃癌,提示胃粘膜
9、上皮的損傷和/或胃粘膜微環(huán)境的改變有利于EBVaGC的發(fā)生。 第三部分普通胃癌中EBVAGC EBNA1基因變異 [目的] 研究廣州地區(qū)EBVaGC中EBNA1基因變異情況,并與該地區(qū)鼻咽癌和世界其他地區(qū)EBVaGC中的情況相比較,探討EBNA1基因變異的意義,幫助闡明EBV致上皮癌變的機制。 [材料和方法] 采用PCR和DNA測序相結(jié)合的方法,擴增EBNA1基因片段并進行序列分析,研究課題組已收
10、集的45例EBVaGC中的EBNA1基因變異情況,統(tǒng)計分析不同EBNA1變異型所占的比例。 [結(jié)果] 45例EBVaGC標本成功擴增21例,占46.7%。在EBVaGC組織中可以檢測到V—val,V—leu,P—ala和V—thr四種亞型,其中V—val亞型是最常見的亞型,占71.4%(15/21),其次是V—leu亞型,占57.1%(12/21);單一 EBNA1亞型感染占61.9%(13/21)。 [結(jié)論]
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