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1、目的:根據(jù)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)在腫瘤組織血管內(nèi)皮表達(dá)的特異性及顆粒酶B(granzyme B,GraB)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用,該課題采用基因工程技術(shù),研制以血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)分子結(jié)構(gòu)域肽段引導(dǎo),GraB為效應(yīng)因子,VEGFR為靶分子的融合蛋白,使該蛋白通過(guò)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)與VEGFR的識(shí)別,特異性地作用于新生血管內(nèi)皮細(xì)胞,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,探討重組VEGF結(jié)構(gòu)域與GraB融合蛋白是否具有破壞新生血管的功
2、能.建立VEGF結(jié)構(gòu)域與GraB融合基因逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移體系,觀察其對(duì)大腸癌細(xì)胞的殺傷作用,探討轉(zhuǎn)VEGF結(jié)構(gòu)域與GraB融合基因治療腫瘤的可行性.結(jié)論:建立了GraB原核表達(dá)系統(tǒng),重組蛋白GraB大量獲得將對(duì)于研究其結(jié)構(gòu)與功能有重要意義,為其制各級(jí)生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ).VEGF結(jié)構(gòu)域原核表達(dá)系統(tǒng)和VEGF結(jié)構(gòu)域與CraB融合蛋白的原核表達(dá)系統(tǒng)的建立為他們?cè)谀[瘤生物靶向治療奠定了基礎(chǔ).VEGF結(jié)構(gòu)域與Cra8融合基因逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移體系,為轉(zhuǎn)Gr
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