豬FUT2基因表達(dá)規(guī)律、遺傳變異及其效應(yīng)的初步分析.pdf

1、課題組前期利用基因芯片技術(shù)在蘇太仔豬E.coli F18抗性型和敏感型資源群體中進(jìn)行斷奶仔豬E.coliF18抗性相關(guān)基因的篩選，確定了鞘糖脂生物合成—球系列通路及通路中FUT1、FUT2、ST3GAL1、HEXA、HEXB、B3GALNT1、NAGA等7個功能基因?qū)嗄套胸iE.coliF18抗性可能具有重要的調(diào)控作用，并對其中基因功能研究相對清楚的FUT1基因的遺傳變異、基因表達(dá)及遺傳效應(yīng)進(jìn)行了系統(tǒng)分析。
　　FUT2基因與FU

2、T1基因同樣作為鞘糖脂生物合成—球系列通路中的關(guān)鍵基因，參與機(jī)體ABO血型抗原和糖結(jié)構(gòu)等的合成，在機(jī)體多種受體形成和信號傳遞轉(zhuǎn)導(dǎo)生物過程中發(fā)揮重要作用。同時，有研究表明ABO血型抗原與包括E.coli F18在內(nèi)的多種病原菌（細(xì)菌和病毒）的粘附侵染相關(guān)。因此，本試驗利用Real time-PCR方法在蘇太豬E.coli F18抗性型和敏感型群體、梅山豬E.coli F18抗性型和敏感型群體以及蘇太豬從初生到斷奶不同日齡群體的11個組織中

3、，進(jìn)行FUT2基因與FUT1基因mRNA表達(dá)水平分析，探討FUT2基因表達(dá)水平與E.coli F18抗性的關(guān)系，并且在梅山豬、蘇太豬和大白豬3個品種斷奶仔豬中分析FUT2基因與FUT1基因的表達(dá)水平，進(jìn)一步分析FUT2基因在遺傳背景不同的群體間的表達(dá)。同時，本試驗利用PCR-SSCP的方法對FUT2基因的編碼區(qū)和部分上游序列共1450 bp區(qū)域進(jìn)行遺變異位點檢測，并分析大白豬群體中變異位點對基因表達(dá)水平、部分重要免疫因子水平和重要經(jīng)濟(jì)性

4、狀的影響，以期尋找有育種價值的分子遺傳標(biāo)記，為基于FUT2基因豬E.coli F18抗性分子選育提供一定的指導(dǎo)和依據(jù)。主要試驗結(jié)果如下:
　　1、FUT2基因在蘇太豬E.coli F18抗性型個體11個組織中mRNA的表達(dá)水平普遍低于E.coli F18敏感型個體，在胃、十二指腸、空腸組織中存在顯著性差異(P＜0.05); FUT1基因在蘇太豬E.coli F18抗性型個體11個組織中表達(dá)水平普遍高于敏感型個體，但是差異不顯著。F

5、UT2基因在腸道組織中的較低水平表達(dá)和FUT1基因的較高水平表達(dá)有利于提高蘇太仔豬對E.coli F18的抗性。
　　2、FUT2基因在蘇太豬從初生到斷奶仔豬（8日齡，18日齡，28日齡，35日齡）中發(fā)育性表達(dá)規(guī)律表明，在腸道組織（十二指腸和空腸）中，F(xiàn)UT2基因的表達(dá)量在28日齡和35日齡期間較8日齡和18日齡呈下降趨勢。并且在空腸組織中，18日齡至35日齡期間的FUT2基因表達(dá)量顯著低于8日齡(P＜0.05);在十二指腸組織中

6、，F(xiàn)UT1基因在28日齡和35日齡表達(dá)水平顯著高于8日齡和18日齡（P＜0.05），在空腸組織中，F(xiàn)UT1基因在35日齡表達(dá)水平顯著高于其它3個日齡組(P＜0.05)。試驗結(jié)果進(jìn)一步表明:FUT2基因在腸道組織中的較低水平表達(dá)和FUT1基因的較高水平表達(dá)有利于提高蘇太仔豬對E.coliF18的抗性。
　　3、在梅山豬E.coli F18抗性型和敏感型個體中，F(xiàn)UT2基因表達(dá)水平在不同個體間11個組織均差異不顯著;FUT1基因表達(dá)水

7、平在抗性型和敏感型個體11個檢測組織中差異均不顯著。試驗結(jié)果提示FUT2基因和FUT1基因表達(dá)水平與梅山仔豬E.coli F18抗性不存在顯著的關(guān)聯(lián)。
　　4、在不同品種中:FUT2基因在蘇太豬腸道組織（十二指腸、空腸）中表達(dá)水平顯著低于梅山豬和大白豬（P＜0.05）;在免疫組織（淋巴結(jié)）中，蘇太豬和梅山豬FUT2基因的表達(dá)水平顯著低于大白豬(P＜0.05); FUT1基因在腸道組織（十二指腸、空腸）和免疫組織（胸腺）中，蘇太豬F

8、UT1基因的表達(dá)水平顯著高于大白豬和梅山豬（P＜0.05），并且呈現(xiàn)蘇太豬＞大白豬＞梅山豬的趨勢。
　　5、在豬FUT2基因編碼區(qū)和部分上游序列(起始密碼子ATG開始)-84 bp位點處檢測到(C/T)位點突變。大白豬存在CC、CT、TT3種基因型，蘇太豬存在CC、CT2種基因型，梅山豬僅有CC基因型，均偏離Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。大白豬CC基因型個體FUT2基因表達(dá)水平顯著高于TT基因型個體(P＜0.05)，不同基