構(gòu)樹(shù)總黃酮對(duì)表皮細(xì)胞防護(hù)作用研究.pdf

1、該研究的目的是構(gòu)樹(shù)葉中提取天然成分,并研究其對(duì)表皮細(xì)胞的防護(hù)作用.首先,收集構(gòu)樹(shù)葉和提取構(gòu)樹(shù)總黃酮(total flzvonoids of Broussonetiapapyrifera,TFBP).取粉碎的構(gòu)樹(shù)葉干粉1000g,75％乙醇冷浸提取24h,收集浸液,藥渣再用乙醇抽提,混合浸取液,用石油醚除雜質(zhì)后,上聚酰胺柱,先用蒸餾水洗脫至無(wú)色,再用2000m195％乙醇洗脫,洗脫液經(jīng)65℃水浴濃縮得到褐黃色固體2.008g,定性鑒定<'

2、[5]>和黃酮類物質(zhì)的一般性質(zhì)相符.蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,分光光度法測(cè)定黃酮類物質(zhì)的含量為7.91％.加標(biāo)回收法測(cè)得平均回收率為99.53％,并通過(guò)抗油脂氧化反應(yīng)實(shí)驗(yàn)初步判定提取物具有抗氧化性.其次,用波長(zhǎng)為365nm,劑量1.38J/cm<'2>的紫外線照射,觀察細(xì)胞損傷現(xiàn)象:多數(shù)細(xì)胞的胞體萎縮、胞漿暗、細(xì)胞變小、變圓、角質(zhì)化增強(qiáng)、細(xì)胞脫落.初步證實(shí)紫外線對(duì)表皮細(xì)胞有損傷作用.最后,通過(guò)酶消化表皮細(xì)胞,并分別給予不同劑量紫外線、鉛、砷,不同劑

3、量的構(gòu)樹(shù)總黃酮TFBP處理細(xì)胞,通過(guò)噻唑藍(lán)(MTT)染色法檢測(cè)細(xì)胞活性、細(xì)胞裂解液中MDA含量、SOD和GSH-Px活力變化,以判斷構(gòu)樹(shù)總黃酮是否對(duì)表皮細(xì)胞有保護(hù)作用.綜上所述,在該實(shí)驗(yàn)條件下,從構(gòu)樹(shù)葉中能夠提取得到構(gòu)樹(shù)總黃酮,含量為0.273g/kg.大劑量的紫外線、鉛、砷分別作用表皮細(xì)胞,可以使細(xì)胞的活性降低,對(duì)細(xì)胞有損害作用.當(dāng)添加100~200mg/L的構(gòu)樹(shù)總黃酮TFBP后,細(xì)胞活性升高,MDA含量明顯下降,SOD和GSH-Px