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文檔簡介
1、一.姜黃素對慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的大鼠行為異常的影響
目的:探討姜黃素對慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的大鼠行為學(xué)改變的影響及初步作用機(jī)制。
方法:雄性SD大鼠連續(xù)制動應(yīng)激21天,采用新奇事物的認(rèn)知實(shí)驗(yàn)和糖水消耗實(shí)驗(yàn),比較應(yīng)激前后大鼠體重變化及行為的改變,觀察姜黃素對慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的大鼠行為異常的調(diào)節(jié)作用。采用放免法測定應(yīng)激大鼠血清中皮質(zhì)酮含量及姜黃素的作用;用RT-PCR法比較用藥前后促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子的水平。
結(jié)
2、果:慢性應(yīng)激大鼠體重增長緩慢,對新奇事物的認(rèn)知能力明顯下降,糖水消耗量明顯下降,姜黃素能逆轉(zhuǎn)上述反應(yīng)。與正常組相比,應(yīng)激組大鼠腎上腺/體重比值增加,血清中皮中酮含量明顯增加,CRF表達(dá)明顯增加。連續(xù)口服給予姜黃素21天后,大鼠腎上腺/體重比值明顯降低,血清皮質(zhì)酮含量明顯降低,CRF表達(dá)明顯降低。
結(jié)論:姜黃素對慢性應(yīng)激大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力和抑郁樣行為有明顯的改善作用,其機(jī)制可能與下丘腦-垂體-腎上腺軸功能的改變有關(guān)。
3、 二.姜黃素對皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的大鼠皮層神經(jīng)元神經(jīng)可塑性變化的調(diào)節(jié)-與5-HT依賴的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)
目的:探討姜黃素對皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的皮層神經(jīng)元神經(jīng)可塑性變化的調(diào)節(jié)作用。
方法:體外建立原代培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)元細(xì)胞模型,采用皮質(zhì)酮誘導(dǎo)細(xì)胞損傷。Real-time RT-PCR方法檢測皮質(zhì)酮處理的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)5-HT受體亞型表達(dá)的變化及姜黃素對其調(diào)節(jié)作用。利用不同5-HT受體拮抗劑檢測姜黃素對受體亞型的作用。采用LDH
4、法檢測細(xì)胞活力,應(yīng)用GFP轉(zhuǎn)染法觀察姜黃素對神經(jīng)可塑性的影響。采用Real-time RT-PCR法檢測姜黃素對神經(jīng)突觸蛋白的調(diào)節(jié)作用。利用免疫熒光雙標(biāo)記法檢測姜黃素對5-HT和突觸小泡蛋白的影響。利用ELISA方法檢測cAMP和PKA水平。采用western blotting法來觀察CREB和磷酸化CREB的表達(dá)及姜黃素對它們的調(diào)節(jié)作用。
結(jié)果:結(jié)果顯示,皮質(zhì)酮顯著降低大鼠皮層神經(jīng)元5-HT1A、5-HT2A和5-HT4
5、 mRNA的表達(dá),姜黃素上調(diào)5-HT1A和5-HT4的表達(dá),對5-HT2A則無明顯影響。姜黃素可以劑量依賴性地逆轉(zhuǎn)皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷和對神經(jīng)可塑性的改變,5-HT1A受體拮抗劑NAN-190和5-HT4受體拮抗劑RS39604逆轉(zhuǎn)這一作用。同時(shí),姜黃素能上調(diào)皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的cAMP、PKA和pCREB水平的降低,對cAMP的影響可被5-HT4受體拮抗劑所阻斷,但5-HT1A受體拮抗劑沒有明顯作用。姜黃素對PKA和pCREB的上調(diào)作用可被5
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