應(yīng)用RNAi技術(shù)研究DICER1和E-cadherin基因與胃癌的相關(guān)性.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文應(yīng)用RNAi技術(shù)研究DICER1和Ecadherin基因與胃癌的相關(guān)性姓名：鄭志紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：孫開(kāi)來(lái)20050301中文論著摘要j、___，第一部分抑制E—cadherin基因表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲力的影響摘要腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟的發(fā)展過(guò)程，涉及許多基因的改變，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的基因。細(xì)胞黏附分子E—cadherin蛋白是維持上皮細(xì)胞極性及細(xì)胞間連接的糖蛋白，其結(jié)

2、構(gòu)和功能的異?？蓪?dǎo)致細(xì)胞間黏附能力減弱，在腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要的作用。在許多胃癌組織和胃癌細(xì)胞系中E—cadherin基因表達(dá)缺失。E—cadherin基因抑制腫瘤浸潤(rùn)最直接的證據(jù)是將未分化的具有侵襲性的腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染正常的E—cadherincDNA后逆轉(zhuǎn)為分化表型的細(xì)胞。為了充分證明E—cadherin對(duì)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移抑制功能，我們應(yīng)用RNA干涉技術(shù)抑制MKN45細(xì)胞中E—cadherin基因的表達(dá)，分析RNA干涉前后細(xì)胞侵襲力

3、的改變，以說(shuō)明E—cadherin在腫瘤轉(zhuǎn)移抑制中的作用，并且分別針對(duì)該基因5端非編碼區(qū)和下游編碼區(qū)設(shè)計(jì)不同的siRNA，分析他們對(duì)E—cadherin基因的抑制效應(yīng)，本研究對(duì)進(jìn)一步分析RNA干涉的分子機(jī)制和更有效的利用RNAi作為工具進(jìn)行基因功能的研究等具有重要的意義。材料及方法胃癌細(xì)胞系MKN45，由日本理化研究所橫山和尚教授惠贈(zèng)，來(lái)源于低分化腺癌，細(xì)胞培養(yǎng)于含10％小牛血清、100U／ml青霉素和100ug／ml鏈霉素的RPMll