乳腺癌中Twist、E-cadherin和ER基因的表達及相關研究.pdf

1、目的:本研究通過檢測人乳腺癌細胞株和乳腺浸潤性導管癌中扭曲基因(Twist)、E-鈣粘附素(E-cadherin)、雌激素受體(ER)的表達水平及其相關性分析，探討三者在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉移中的作用，為患者的預后判斷及治療提供一定參考依據(jù)。
　　 方法:1、采用逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)檢測4種具有不同侵襲、轉移能力的乳腺癌細胞株(MDA-MB-435、MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7)和16

2、例人乳腺浸潤性導管癌(invasive ductal carcinoma, IDC)及癌旁組織中Twist、E-cadherin和ER的mRNA表達情況，分析Twist、E-cadherin、ER mRNA表達的相關性及與乳腺癌轉移潛能的關系;
　　 2、采用免疫組織化學(immunohistochemistry,IHC)法檢測4種乳腺癌細胞株和16例乳腺浸潤性導管癌及癌旁組織中Twist、E-cadherin和ER蛋白的表達并

3、分析三種蛋白表達相關性。
　　 3、應用SPPSS13.0統(tǒng)計分析軟件處理數(shù)據(jù)，RT-PCR法檢測乳腺癌和癌旁組織中Twist、E-cadherin、ER表達結果比較采用t檢驗，免疫組化結果比較采用Fisher精確概率法，相關性分析用非參數(shù)相關性Spearman檢驗，檢驗水準均取雙側α=0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:1、RT-PCR法檢測結果顯示，4種乳腺癌細胞株中，Twist在低侵襲低轉移的乳

4、腺癌細胞株MCF-7中低表達，在高轉移高侵襲的MDA-MB-435、MDA-MB-231和ZR75-30細胞株中均為高表達，ER和E-cadherin與Twist表達情況則相反，在MCF-7細胞株中表達量最高，在MDA-MB-231、MDA-MB-435和ZR75-30細胞株中微弱表達或不表達;在浸潤性導管癌和癌旁組織中，Twist表達量分別為1.05±0.52、0.25±0.13，E-cadherin表達量分別為0.03±0.03、0

5、.11±0.06，ER表達量分別為0.04±0.03、0.37±0.31，兩者差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　 2、免疫組織化學染色結果顯示:Twist蛋白在低侵襲性人乳腺癌MCF-7細胞株中幾乎不表達，而在其它三種高侵襲性人乳腺癌細胞株中均呈高表達，且表達水平與乳腺癌侵襲特性呈正相關;E-cadherin蛋白和ER蛋白在低侵襲性人乳腺癌MCF-7細胞株相對高表達，而在其它三種高侵襲性人乳腺癌細胞株中低表達或不表達，

6、表達水平與乳腺癌侵襲特性呈負相關;在16例乳腺癌和癌旁組織中，Twist蛋白陽性率分別為81.3％和25％，前者表達明顯高于后者，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，E-cadherin和ER蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率分別為31.3％、37.5％，明顯低于癌旁組織中的陽性表達率(75％、87.5％)，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);
　　 3、三種基因mRNA及蛋白表達相關性分析:在mRNA水平及蛋白水平，Twist與E-

7、cadherin(r=-0.787,P＜0.05; r=-0.713,P＜0.01)、Twist與ER(r=-0.741，P＜0.05; r=-0.620，P＜0.05)的表達均呈負相關;E-cadherin和ER表達呈正相關(r=0.854，P＜0.01; r=0.592，P＜0.05)。
　　 結論:
　　 1.在乳腺浸潤性導管癌中，Twist mRNA及蛋白過表達，E-cadherin、ER mRNA及蛋白低表達，

8、提示三者可能與乳腺癌發(fā)生發(fā)展有關;
　　 2.乳腺癌細胞株和組織標本中Twist的高表達和E-cadherin、ER的低表達與乳腺癌侵襲轉移能力相關，提示三者可能參與了乳腺癌的浸潤、轉移過程;
　　 3.乳腺癌中Twist與E-cadherin、ER的表達均呈負相關，E-cadherin與ER的表達呈正相關，提示聯(lián)合檢測Twist和E-cadherin和ER指標，將為進一步預測乳腺癌的轉移、預后判斷以及指導臨床選擇治療方