HGF、c-Met及VEGF在鼻息肉中的表達(dá)及其臨床病理意義.pdf

1、背景：鼻息肉(nasal polyps,NP)是鼻腔和鼻竇粘膜的常見慢性疾病,以極度水腫的鼻粘膜在中鼻道形成單發(fā)或多發(fā)的息肉為臨床特征。作為耳鼻咽喉科的常見病和多發(fā)病,其在成人中的發(fā)病率為1％~2％,在支氣管哮喘、阿司匹林耐受不良、變應(yīng)性真菌性鼻竇炎以及囊性纖維化病人中的發(fā)病率可達(dá)15％以上,手術(shù)和保守治療后復(fù)發(fā)率較高,給患者造成一定的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確,近年來的研究表明可能與感染,免疫及細(xì)胞因子的作用有關(guān)。肝細(xì)胞

2、生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一種多功能的細(xì)胞因子,其具有多種生物活性如:促進(jìn)細(xì)胞增殖分化、游走和擴(kuò)散,器官生成,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤等;除此之外,HGF還具有趨化作用并可以刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖遷移,促進(jìn)血管生成,目前HGF已被列為重要的促血管生成因子。c-Met蛋白是由原癌基因c-met編碼表達(dá)的一種細(xì)胞膜受體,目前它被認(rèn)為是HGF唯一的受體,與HGF結(jié)合后組成信號通路后發(fā)揮作用。血管內(nèi)皮生長因子

3、(vascularendothelial growth factor,VEGF)是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的多肽因子,有刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增生,增加血管通透性并誘導(dǎo)新生血管生成的作用。目前國外有關(guān)HGF及c-Met在鼻息肉中的表達(dá)報道甚少,有關(guān)VEGF在鼻息肉組織中的表達(dá)報道不一,且在國內(nèi)未見在鼻息肉發(fā)生發(fā)展中HGF、c-Met及VEGF三種蛋白的相關(guān)性研究。故本課題取30例鼻息肉手術(shù)后患者鼻息肉組織,與20例鼻中隔偏曲手術(shù)患者下鼻甲黏膜組織作

4、對照,檢測了這兩種組織中HGF、c-Met及VEGF蛋白的表達(dá)情況,并對他們之間的相關(guān)性進(jìn)行研究,借以探討這三種因子在鼻息肉的發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)意義及相關(guān)的病理學(xué)機(jī)制。
　　材料與方法：1.臨床病例資料:以30例鼻息肉組織標(biāo)本作為研究對象。所有病例臨床資料完整,所有病例術(shù)前半年內(nèi)均無應(yīng)用類固醇藥物、抗組胺及抗生素藥物史,亦不合并阿司匹林耐受不良。另取20例正常下鼻甲黏膜組織標(biāo)本作為對照組。2.實驗方法和結(jié)果判定:對30例鼻息肉組織

5、和20例下鼻甲黏膜組織進(jìn)行HE復(fù)染并采用免疫組化SP法檢測上述鼻息肉組織及正常下鼻甲黏膜組織標(biāo)本中HGF蛋白、c-Met蛋白及VEGF蛋白的表達(dá)。三種分子均是以胞漿呈現(xiàn)棕黃和/或棕褐染色為陽性細(xì)胞,取染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)百分比兩個指標(biāo)打分相乘,所得結(jié)果>3分即為免疫反應(yīng)陽性,進(jìn)行結(jié)果判定。3.統(tǒng)計學(xué)分析:應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析,采用卡方檢驗(χ~2檢驗)和Fisher’s精確概率法進(jìn)行顯著性檢驗,相關(guān)分析應(yīng)用列聯(lián)表的關(guān)聯(lián)性

6、分析。檢驗標(biāo)準(zhǔn):α=0.05。
　　結(jié)果：1.HE染色結(jié)果為細(xì)胞核呈藍(lán)色、深藍(lán)色或藍(lán)黑色,胞漿呈淡粉色或淡紅色。光鏡下見鼻息肉表面被覆以假復(fù)層纖毛柱狀上皮,部分可見鱗狀上皮化生?；啄ぴ龊?間質(zhì)明顯水腫,間質(zhì)內(nèi)小血管擴(kuò)張?？梢娤袤w增生,腺管呈現(xiàn)不規(guī)則形狀。在上皮下、血管和腺體周圍有較顯著的炎癥細(xì)胞浸潤,其中主要是嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞以及肥大細(xì)胞等。嗜酸性粒細(xì)胞為雙葉核、“熊貓眼”樣細(xì)胞。而下鼻甲黏膜組織中腺管多呈圓形,間

7、質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤較少,嗜酸性粒細(xì)胞幾乎未見。2.HGF蛋白的陽性產(chǎn)物主要定位于細(xì)胞漿,呈棕黃色或棕褐色。光鏡下見其廣泛表達(dá)于鼻息肉組織中的黏膜上皮細(xì)胞、腺體細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及間質(zhì)內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞胞漿內(nèi)。HGF蛋白在鼻息肉組織和正常下鼻甲黏膜組織中的陽性表達(dá)率分別為83.33％和30.00％,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在單側(cè)與雙側(cè)鼻息肉中的陽性表達(dá)率分別為50.00％和95.45％,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05

8、)。3.c-Met蛋白陽性染色部位主要位于細(xì)胞胞漿,為棕黃色或棕褐色染色。光鏡下可見其主要表達(dá)于鼻息肉組織中的黏膜上皮細(xì)胞、腺體細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及間質(zhì)內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞胞漿內(nèi)。c-Met蛋白在鼻息肉組織和對照組下鼻甲黏膜組織中陽性表達(dá)率分別為86.67％和25.00％。兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在單側(cè)與雙側(cè)鼻息肉中的陽性表達(dá)率分別為25.00％和95.45％,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。4.VEGF的陽性

9、產(chǎn)物也主要定位于細(xì)胞漿,呈棕黃色或棕褐色染色。光鏡下可見其主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管內(nèi)附壁細(xì)胞以及間質(zhì)內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞。VEGF蛋白在鼻息肉組織和對照組下鼻甲黏膜陽性表達(dá)率分別為76.67％和10.00％。兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在單側(cè)與雙側(cè)鼻息肉中的陽性表達(dá)率分別為50.00％和100.0％,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。5.HGF蛋白表達(dá)陽性病例中,c-Met蛋白表達(dá)陽性率為96.00％,HGF蛋白表

10、達(dá)陰性病例中c-Met蛋白表達(dá)陽性率40.00％,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,結(jié)果顯示列聯(lián)系數(shù)r=0.523,P<0.01,兩種蛋白在鼻息肉組織中的表達(dá)有關(guān)聯(lián)性。6.HGF和VEGF的共同表達(dá)部位在鼻息肉血管內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞中。在血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi):HGF表達(dá)陽性的病例中,VEGF表達(dá)陽性率為92.00％,在HGF表達(dá)陰性的病例中,VEGF表達(dá)陽性率為0。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,結(jié)果顯示列聯(lián)系數(shù)為r=0.630,P<0.01。在間質(zhì)浸潤的炎癥細(xì)胞內(nèi):

11、HGF表達(dá)陽性的病例中,VEGF表達(dá)陽性率為88.00％,在HGF表達(dá)陰性的病例中,VEGF表達(dá)陽性率為20.00％。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,結(jié)果顯示列聯(lián)系數(shù)為r=0.514,P<0.01。結(jié)果顯示在鼻息肉組織中,HGF和VEGF在血管內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)內(nèi)浸潤的炎癥細(xì)胞中的表達(dá)有關(guān)聯(lián)性。7.c-Met蛋白表達(dá)陽性病例中,VEGF蛋白表達(dá)陽性率為88.46％,c-Met蛋白表達(dá)陰性病例中VEGF蛋白表達(dá)陽性率為0,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,結(jié)果顯示列聯(lián)系數(shù)r=0.

12、579,P<0.01,兩種蛋白在鼻息肉組織中的表達(dá)有關(guān)聯(lián)性。
　　結(jié)論：1.HGF及其受體c-Met蛋白在鼻息肉組織中呈高表達(dá),HGF/c-Met結(jié)合后誘導(dǎo)上皮細(xì)胞的分裂增殖及損傷后的修復(fù),并且引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移,導(dǎo)致血管通透性增加,提示HGF/c-Met信號通路在鼻息肉的形成和發(fā)展中起到重要的作用。2.VEGF主要表達(dá)于鼻息肉組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞及間質(zhì)浸潤的炎癥細(xì)胞中,VEGF可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖,促進(jìn)血管新生,增強(qiáng)

13、炎癥反應(yīng),提示VEGF在加重鼻息肉癥狀及為鼻息肉的發(fā)展提供營養(yǎng)支持等方面起到重要的作用。3.HGF、c-Met及VEGF這三種蛋白在鼻息肉中表達(dá)有相關(guān)性,提示其可能協(xié)同參與鼻息肉的生成與發(fā)展。4.HGF、c-Met及VEGF蛋白表達(dá)在單側(cè)鼻息肉組與雙側(cè)鼻息肉組的比較中差異有統(tǒng)計學(xué)意義,但在鼻息肉不同臨床分型、不同性別、不同年齡組(<18和≥18)的組內(nèi)比較中差異無統(tǒng)計學(xué)意義。提示這三種蛋白參與了鼻息肉的形成過程,但是與其臨床分型、患者的