三七紫外指紋圖譜的研究.pdf

1、三七[Panax notoginseng(Burk)F.H Chen]為五加科人參屬的重要藥用植物，主要以干燥根入藥，具有散淤止血，消腫定痛的功效。其主要成分有三七總皂苷，目前，已從三七不同部位中分離出60多種單體皂苷類成分，其中大部分為達瑪烷型四環(huán)三萜皂苷。三七總皂苷具有止血活血、補血、鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜、抗炎、抗衰老、抗腫瘤等多種藥理活性，主要用于治療心腦血管系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病等。紫外指紋圖譜法分別采用多種不同極性溶劑對藥材中不同極

2、性區(qū)間的成分進行提取，從整體上更為細致的反映藥材的成分信息，可以用于中藥材的品種鑒別及同種藥材的質(zhì)量評價。皂苷類成分的紫外吸收較弱，使得紫外光譜技術(shù)在三七質(zhì)量評價中的應用具有一定的局限性;另一方面，皂苷類成分與某些特定的顯色劑會有顯色反應，從而增強皂苷類成分的紫外吸收，這一方法已廣泛應用在皂苷類成分的定量分析中。顯色劑顯色結(jié)合紫外光譜法分析三七紫外指紋圖譜，在全面反映三七化學成分信息的同時，強調(diào)了三七中皂苷類成分的紫外特征，符合中藥指紋

3、圖譜完整性和特征性的要求。
　　 本研究采用氯仿、乙醇和水對三七中不同極性區(qū)間的成分進行分步提取，利用紫外光譜儀構(gòu)建三七紫外指紋圖譜，對三七的指紋圖譜進行系統(tǒng)研究。主要研究結(jié)果如下：⑴三七不同溶劑提取液的紫外吸收主要在190-250 nm的波長范圍。雙指標序列分析法、聚類分析法和主成分分析法的結(jié)果與圖譜直觀分析結(jié)果一致，三七紫外指紋圖譜的相似性較小，變異性較大;三七樣品因生長年限和產(chǎn)地的不同，其紫外指紋圖譜有較大的差異性。⑵采用

4、氯仿、乙醇和水對三七樣品進行提取，分別在三種提取液中加入一定量5％硫酸香草醛、10％硫酸、1％氯化鋁、5％磷酸香草醛、5％冰乙酸香草醛、5％冰乙酸香草醛+高氯酸(1∶4)，構(gòu)建不同溶劑及顯色劑條件下三七紫外指紋圖譜。結(jié)果顯示，不同顯色劑條件下，三七紫外指紋圖譜重現(xiàn)性、精密度和穩(wěn)定性良好，RSD值均小于1％;指紋圖譜直觀對比、方差分析和聚類分析結(jié)果表明，加入10％硫酸和1％氯化鋁對三七紫外指紋圖譜沒有顯著影響;加入5％硫酸香草醛、5％磷酸

5、香草醛、5％冰乙酸香草醛和5％冰乙酸香草醛+高氯酸(1∶4)4種顯色劑對三七的紫外指紋圖譜具有顯著影響，吸收峰數(shù)目明顯增多，吸收波長范圍變寬。⑶采用雙指標序列、系統(tǒng)聚類、主成分分析、PLS-MD分析等四種方法對5％硫酸香草醛、5％磷酸香草醛和5％冰乙酸香草醛三種顯色劑顯色，結(jié)果顯示三七樣品的共有峰率數(shù)據(jù)分布較為集中，主要分布在50％-70％范圍之間。PLS-MD分析表明，不同產(chǎn)地和生長年限的三七樣品紫外指紋圖譜有差異，依據(jù)產(chǎn)地和生長年限

6、可對三七樣品進行分類。不同顯色劑顯色后其分類結(jié)果有差異，硫酸香草醛顯色后，三七樣品按產(chǎn)地分為云南文山、云南其他產(chǎn)區(qū)和廣西靖西三類;磷酸香草醛顯色后，云南紅河所產(chǎn)三七與其他產(chǎn)地三七存在較大差異;冰乙酸香草醛顯色后，不同產(chǎn)地之間有交叉，樣品的分類特征不明顯。通過主成分分析可以明確區(qū)分不同產(chǎn)地和不同生長年限的三七樣品。⑷采用冰乙酸香草醛-紫外指紋圖譜法對三七不同藥用部位（須根、主根、根莖、莖、葉和種子）的紫外指紋圖譜進行研究，共有峰率和變異峰