血清轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-,1-(TGF-β-,1-)的表達(dá)與肺放射性損傷的相關(guān)性研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文血清轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ)的表達(dá)與肺放射性損傷的相關(guān)性研究姓名：姚鴻民申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：李光20040401實(shí)驗(yàn)組鼠于照射后觀察大鼠的呼吸頻率，照射前及照射后第2和第4周時(shí)，分別經(jīng)大鼠尾靜脈取外周血200—300p1，于4。C下2000rpm離心10分鐘，取上清液，一70℃低溫冰箱內(nèi)保存，待檢。空白對(duì)照組也于相應(yīng)時(shí)間時(shí)，觀察呼吸頻率并取外周血，待檢。動(dòng)物照射方法：大鼠麻醉采用2％戊巴比妥

2、鈉腹腔內(nèi)注射麻醉，用藥劑量為50rag／kg。用自行設(shè)計(jì)的大鼠固定架將大鼠固定，用射線能量為6MV的x線進(jìn)行外照射。源皮距(SSD)1米，劑量率為2Gy／min，照射野面積為2515cm，包括全部右肺在射野內(nèi)。TGF—p，的測(cè)定：采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血清TGF—p，含量。具體操作步驟如下：(1)提前30分鐘從冰箱中取出試劑盒及樣品，平衡至室溫；濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋，標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液及質(zhì)控稀釋液稀釋，(2)每孔加入1

3、00出樣品或不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控，(3)每孔加入400p1PBS液，重復(fù)洗板3次，每次均需在吸水紙上拍干，(4)每孔加入1001xlTGF—B，單抗BAF_240，室溫下孵化20分鐘，甩干液體，每孔加入400txlPBS液，重復(fù)洗板3次，每次均需在吸水紙上拍干，(5)每孔加入1001xl底物A、B(各501x1)混合液，避光室溫20—25分鐘，每孔加入lOOp1終止液，混勻后30分鐘內(nèi)于酶標(biāo)儀450nm處讀取結(jié)果。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：照射前、后

4、血清中TGFB，平均水平用iS表示，兩樣本均數(shù)用t檢驗(yàn)，多個(gè)樣本均數(shù)用F檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)處理采用SPSSll5軟件包。結(jié)果1放射損傷臨床表現(xiàn)大鼠照射后，肺損傷的癥狀主要表現(xiàn)為呼吸急促和呼吸頻率增快。其中10Gy組表現(xiàn)不明顯，呼吸頻率升高較輕，且出現(xiàn)時(shí)間較晚。而20Gy組、30Gy組表現(xiàn)明顯，呼吸頻率升高較早。放射損傷的程度與照射劑量成正比，即照射量大者癥狀出現(xiàn)早，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，損傷表現(xiàn)明顯。而放射劑量小者損傷表現(xiàn)較輕。2血清標(biāo)本TGFB。的測(cè)定