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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β及其Ⅱ型受體在大腸癌中的表達(dá)姓名:鄒瓔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):外科學(xué)指導(dǎo)教師:何超黃學(xué)鋒2001.5.1預(yù)后判斷的價(jià)值。初步探討大腸癌細(xì)胞逃避TGF—B1負(fù)調(diào)控的可能機(jī)制,為進(jìn)步了解T6F一131和TGF—BR—II在大腸癌形成中的作用提供依據(jù)。1實(shí)驗(yàn)對(duì)象標(biāo)本取自2000年2月至2000年11月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院肛腸外科手術(shù)切除的40例大腸癌組織和癌旁正常組織(遠(yuǎn)切緣正常組織,病理證實(shí)無(wú)腫瘤浸潤(rùn)
2、)。其中男24例,女16例:平均年齡5665歲。所有病例均經(jīng)病理證實(shí),按1978年我國(guó)第一次大腸癌科研協(xié)作會(huì)議提出改良Dukes分期:A期10例,B期9例,C期12例,D期9例。2實(shí)驗(yàn)方法21RT—PCR法以TrizolReagent按一步法提取組織總RNA,提取出的RNA經(jīng)凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)鑒定其質(zhì)量及含量。逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,分別PCR擴(kuò)增TGF—B1和B—actin、TBR—II和B—accin。22電泳和結(jié)果觀察PCR產(chǎn)物
3、經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,在紫外透射儀上觀察,出現(xiàn)160hp(TGF—p1)、224bp(B—actin)、342bp(TBR—11)條帶為目的產(chǎn)物。采用KodakDigitalScienceID圖象分析軟件進(jìn)行分析,讀取陽(yáng)性條帶的光密度值,分別計(jì)算TGF~B1和TBR—IImRNA指數(shù)(RI),RI=TGF—BlmRNA或TBR—IImRNART—PCR產(chǎn)物光密度值/B—actinmRNART—PCR產(chǎn)物光密度值。3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法以SPSS100
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