STR-PCR在唐氏綜合征診斷中的應用.pdf

1、目的： 唐氏綜合征(Downsyndrome，DS)又稱21三體綜合征，是一種最常見的先天性染色體數(shù)目畸變，發(fā)病率高達0.13％，給家庭和社會帶來沉重的負擔。目前臨床應用的染色體核型分析方法因檢測周期長、技術難度大、成本高，不適合在普通實驗室開展，不能應用于大規(guī)模的臨床篩查，故迫切需要一種快速、準確的方法對唐氏綜合征患者進行快速診斷，為產(chǎn)前基因診斷、降低患兒出生率奠定基礎。 方法： 選擇21號染色體上唐氏綜合征關

2、鍵區(qū)域(DSCR)內(nèi)部及附近的8個具有高雜合度的短串聯(lián)重復序列(D21S1411、D21S1413、D21S1414、D21S1432、D21S1437、D21S1446、D21S1270、D21S2054)，結合聚合酶鏈反應，以及單鏈構象多態(tài)性進行分析。從97個可疑染色體疾病的無關個體采集外周抗凝血，經(jīng)鹽析法提取基因組DNA，擴增上述8個基因座，通過聚丙烯酰胺凝膠、銀染，所有凝膠均經(jīng)凝膠成像系統(tǒng)分析。同時，所有標本均進行染色體核型分析

3、。 結果： 1、不同個體在某一STR基因座的電泳結果可出現(xiàn)以下4種情況之一：①、只出現(xiàn)一條DNA深帶，為一純合子；②、出現(xiàn)兩條DNA帶，密度比接近1:1，為正常雜合子；③、出現(xiàn)兩條DNA帶，密度比接近2:1，為可疑唐氏綜合征患者；④、出現(xiàn)三條DNA帶，密度比接近1:1:1，可確診為唐氏綜合征患者。 2、97例患者中經(jīng)STR-PCR分析，40例確診為唐氏綜合征，與染色體核型分析結果一致。 3、經(jīng)統(tǒng)計分析，8

4、個STR基因座的雜合度均在75％以上，多態(tài)信息量均在50％以上。 結論： 1、本研究選用的21號染色體上的8個STR基因座，經(jīng)統(tǒng)計學分析，符合Hardy-Weinberg平衡定律，具有高度的多態(tài)性，可作為良好的遺傳標記，8個基因座均可見典型三體帶型。 2、用STR-PCR技術檢測21號染色體上的8個STR基因座的等位基因來診斷經(jīng)典型和易位型唐氏綜合征患者，本研究中與核型分析相比，準確性達100％。該方法對于診斷比