蘇氨酸母液中氨基酸的分離純化研究.pdf

1、蘇氨酸的生產(chǎn)主要以發(fā)酵法為主，要得到蘇氨酸純品必須經(jīng)過(guò)一系列物理和化學(xué)處理，當(dāng)經(jīng)過(guò)預(yù)處理的發(fā)酵液等電點(diǎn)結(jié)晶后，會(huì)產(chǎn)生蘇氨酸母液，母液里包括蘇氨酸、雜質(zhì)氨基酸(谷氨酸、少量的中性氨基酸)、蛋白質(zhì)、殘?zhí)?、無(wú)機(jī)鹽等，如果將其直接排放到環(huán)境中或賣給飼料添加劑廠，不僅降低母液的使用價(jià)值，同時(shí)造成極大的污染。因此重新利用蘇氨酸母液有一定經(jīng)濟(jì)價(jià)值，既可使蘇氨酸母液的價(jià)值得到增值，同時(shí)減少母液排放對(duì)環(huán)境的污染。本論文以蘇氨酸母液為主要原料，對(duì)母液成分含

2、量、氨基酸的分析方法建立、母液脫色、及母液中氨基酸的分離等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，旨在為蘇氨酸母液提供新的、且有效的處理方法，也為應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)提供一定的技術(shù)基礎(chǔ)。 1、為了確定分離對(duì)象，對(duì)蘇氨酸母液成份的質(zhì)量百分含量進(jìn)行了較為詳細(xì)的分析，可知蘇氨酸母液中固含量20.24％(蘇氨酸7.8％、谷氨酸6.9％、糖1.4％、無(wú)機(jī)鹽2.28％和其它物質(zhì)1.66％等)和水分79.76％。 2、蘇氨酸和谷氨酸分析方法的建立。采用茚三酮比色

3、法對(duì)蘇氨酸和谷氨酸的分析，通過(guò)最大波長(zhǎng)掃描，確定λ=570nm作為氨基酸的研究波長(zhǎng)，并且探索茚三酮比色法顯色反應(yīng)的影響因素，確定加熱時(shí)間為30分種，pH為6.0，顯色水浴溫度為100℃，靜放時(shí)間為6min為最佳顯色條件。在這一條件下，建立蘇氨酸和谷氨酸的分析方法，其中蘇氨酸線性濃度范圍為60～130mg/L，標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.0250x-1.3780，相關(guān)系數(shù)為R<'2>=0.9958，而谷氨酸線性濃度范圍為40～90mg/L，GA：y

4、=0.0258x-0.5201相關(guān)系數(shù)為R<'2>=0.9988，因此可得兩種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)加和曲線y=0.0254x-0.9491，測(cè)得母液中總氨基酸量182.3g/L。雖然與HPLC分析法相比有些偏差，但用茚三酮比色法分析簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)。同時(shí)研究了不同稀釋倍數(shù)的母液與吸光度的關(guān)系，得知結(jié)果相對(duì)偏差小于3％，說(shuō)明茚三酮比色法具有較高的準(zhǔn)確性。 3、分別探索了活性炭和717堿性樹脂對(duì)蘇氨酸母液進(jìn)行脫色工藝條件的研究?；钚蕴棵撋珬l件：1.

5、2g/50mL、溫度為50℃、起始pH值6.0和脫色時(shí)間為30min，脫色率達(dá)91％，氨基酸損失率為10％；而717樹脂脫色條件：溫度為25℃，流速為0.167BV/min條件下脫色吸附，采用0.2N的氯化鈉和1.0N的鹽酸梯度洗脫可以有效分離母液中的氨基酸和色素，脫色率達(dá)90％，氨基酸損失率為16％。 4、研究了離子交換法和色譜法分離蘇氨酸和谷氨酸，由于蘇氨酸母液里含有2.28％的無(wú)機(jī)鹽，對(duì)D001陽(yáng)離子交換樹脂吸附蘇氨酸影響