大豆異黃酮提取純化工藝研究.pdf

1、大豆異黃酮是大豆生長過程中產(chǎn)生的一類活性物質(zhì)，有著廣泛的醫(yī)療保健作用。本文對大豆異黃酮的提取、酶解轉(zhuǎn)化及其純化進(jìn)行了研究，優(yōu)化確定了主要工藝參數(shù)，并以剩余豆渣為原料制備了大豆分離蛋白和低聚糖，為大豆的綜合利用提供了有益參考。
　　首先，通過單因素實(shí)驗(yàn)與正交試驗(yàn)或響應(yīng)面優(yōu)化，確定了“普通溶劑萃取”和“超聲輔助萃取”兩種大豆異黃酮常規(guī)提取工藝的最優(yōu)參數(shù)，分別為：普通溶劑萃取“70oC，80％乙醇，固液比1:20（g:mL），4h，80

2、目”，異黃酮提取量為2099.87μg/g豆粉，提取率為85.16%；超聲輔助萃取“超聲功率250w，70%乙醇，固液比1:15(g:mL)，70oC，2h，80目”，異黃酮提取量為2104.25μg/g豆粉，提取率為85.34%。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步設(shè)計(jì)并優(yōu)化了新穎的堿醇式提取工藝，其最佳條件為：pH9.0，80oC，80%乙醇，70min，固液比1:15（g:mL），80目，異黃酮提取量為2372.25μg/g豆粉，提取率為96.21%

3、，結(jié)果表明堿醇式提取工藝更加節(jié)能、高效。
　　其次，利用生物質(zhì)能源領(lǐng)域的新型酶制劑纖維素酶GC-220完成了對糖苷型異黃酮的水解，使其成功轉(zhuǎn)化為活性更高的異黃酮苷元，其最佳反應(yīng)條件為：50oC，pH4.5，加酶量0.65U/mg糖苷型異黃酮，4h，酶解率高達(dá)94.8%，得到大豆異黃酮苷元1398.00μg/g豆粉，證明廉價(jià)的纖維素酶GC-220完全可以代替較為昂貴的β-葡萄糖苷酶，水解轉(zhuǎn)化制備高活性的大豆異黃酮苷元。
　　再

4、次，設(shè)計(jì)了操作簡便的大豆異黃酮純化工藝：對于超聲輔助萃取產(chǎn)物，經(jīng)過堿絮凝酸沉淀、醇沉、乙酸乙酯-水萃取三步純化制得（1838.00μg/g豆粉）、純度為62.09%的異黃酮，最終收率74.54%；對于堿醇式提取與酶解轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，經(jīng)過醇沉、乙酸乙酯-水萃取、水洗三步純化制得（1280.00μg/g豆粉）、純度為87.25%的大豆異黃酮苷元，最終收率80.38%。
　　最后利用提取異黃酮后的剩余豆渣聯(lián)產(chǎn)制得分離蛋白（216.25mg/g