轉(zhuǎn)化生長因子-β1在60%氧致新生鼠支氣管肺發(fā)育不良模型中的作用研究.pdf

1、目的：
　　 在新生兒救治中高濃度氧非常重要，但氧氣又可造成肺損傷，高氧所致的肺損傷是發(fā)生支氣管肺發(fā)育不良的主要因素之一。高氧長時(shí)間進(jìn)入肺部后，產(chǎn)生大量活性氧(reactive oxygen species，ROS)，急性期引起急性肺損傷(acute lung injury，ALI)，并導(dǎo)致慢性肺損傷而致另一并發(fā)癥支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonarydysplasis，BPD)，嚴(yán)重影響患兒生活質(zhì)量，已引起廣泛重視

2、。持續(xù)較高濃度氧吸入可致新生小鼠發(fā)生類似人類支氣管肺發(fā)育不良的肺部改變，因此高氧暴露模型常用于BPD的發(fā)病機(jī)理的研究。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)是與纖維化疾病相關(guān)的生長因子，在高氧肺損傷導(dǎo)致肺纖維化中起多大作用及機(jī)理如何尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過建立60％氧暴露的新生小鼠支氣管肺發(fā)育不良模型，動(dòng)態(tài)觀察高氧暴露后肺組織病理改變、肺組織中TGF-β1的表達(dá)，探討：(1)60％氧暴露對(duì)新生小鼠發(fā)育的影響及肺損傷。(2)在新生鼠BPD肺損傷中

3、的作用。從而為新生鼠高氧肺纖維化發(fā)病機(jī)制及其防治提供一定理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 30只出生24小時(shí)內(nèi)的清潔級(jí)雌性昆明(KM)小鼠作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組15只，實(shí)驗(yàn)組置于封閉氧箱中(FiO20.6)喂養(yǎng)，對(duì)照組置于正?？諝庵?FiO20.21)，制備60％氧濃度致新生小鼠BPD模型，分別于試驗(yàn)開始后第2天、7天、14天、21天和28天記錄小鼠體重、在光學(xué)顯微鏡和透射電鏡下觀察肺組織病理改變；光鏡

4、下做輻射狀肺泡計(jì)數(shù)(RAC)；采用免疫組織化學(xué)染色法研究肺組織TGF-β1的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 (1)體重：吸氧7天后，實(shí)驗(yàn)組明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)；(2)肺形態(tài)學(xué)：與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組肺泡發(fā)育過程受阻，肺損傷逐漸加重，最終纖維化。吸氧7 d開始出現(xiàn)肺泡化障礙；14 d肺泡體積明顯增大、肺泡融合、數(shù)目減少；21 d時(shí)正常的肺泡結(jié)構(gòu)幾乎消失；(3)輻射狀肺泡計(jì)數(shù)(RAC)：吸氧7天后，實(shí)驗(yàn)組RAC值明顯低于

5、對(duì)照組(P＜0.01)；(4)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)(alveolar epithelialtypeⅡ cell，AEC-Ⅱ)：實(shí)驗(yàn)組吸氧2天出現(xiàn)線粒體(Mi)腫脹；7天時(shí)板層小體(LB)開始排空；14d上述變化明顯加重，板層小體基本排空；21天時(shí)線粒體和板層小體消失，肺間質(zhì)有纖維組織增生；28天時(shí)線粒體、板層小體、微絨毛消失，肺間質(zhì)有大量纖維組織增生，細(xì)胞核固縮、融解；(5)TGF-β1的表達(dá)水平：吸氧2天后，實(shí)驗(yàn)組TGF-β1的表