CD200在凋亡細(xì)胞清除中的作用.pdf

1、背景和目的:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種多器官受累的自身免疫疾病,其發(fā)病機(jī)制尚未明確。大量研究表明,細(xì)胞凋亡異常及凋亡清除異常在SLE的發(fā)病過程中具有重要意義。CD200是一種跨膜糖蛋白,在多種細(xì)胞表面均有表達(dá),主要通過與其受體CD200R結(jié)合傳遞免疫調(diào)節(jié)信號(hào)。前期研究發(fā)現(xiàn),SLE患者CD200/CD200R的表達(dá)水平與正常人存在差異,體外培養(yǎng)SLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBM

2、C)的凋亡率高于正常對(duì)照(HC),且在凋亡過程中CD200在PBMC表面的表達(dá)上調(diào),提示SLE患者可能存在CD200/CD200R通路的異常?；诖?本文主要研究了CD200對(duì)樹突狀細(xì)胞(DC)吞噬凋亡細(xì)胞過程的影響。
　　 研究方法:
　　 1.通過流式細(xì)胞術(shù)分選出CD200+的活細(xì)胞、CD200-的活細(xì)胞、CD200+的早期凋亡細(xì)胞、CD200-的早期凋亡細(xì)胞及CD200+的晚期凋亡細(xì)胞,并將這幾組細(xì)胞與體外誘導(dǎo)的自

3、體樹突狀細(xì)胞共孵育。通過熒光顯微鏡及流式細(xì)胞術(shù)分析樹突狀細(xì)胞與各組細(xì)胞的接觸率及吞噬率。
　　 2.通過ELISA法測(cè)定SLE患者及健康對(duì)照凋亡前后培養(yǎng)上清中CD200濃度,并將SLE患者凋亡前后培養(yǎng)上清CD200濃度與SLE活動(dòng)性指標(biāo)(SLEDAI、抗dsDNA滴度、C3、ESR、WBC及Lym)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 3.通過Transwell試驗(yàn)研究游離型CD200對(duì)樹突狀細(xì)胞趨化性的影響。
　　 結(jié)果:<

4、br>　　 共孵育試驗(yàn)、Transwell試驗(yàn)及ELISA結(jié)果如下:
　　 1.CD200+細(xì)胞與樹突狀細(xì)胞的接觸率及吞噬率低于CD200-的細(xì)胞。隨著凋亡過程的發(fā)生,細(xì)胞與樹突狀細(xì)胞的接觸及吞噬率增多。SLE患者活細(xì)胞、早期凋亡細(xì)胞及晚期凋亡細(xì)胞與DC的接觸率有低于HC的趨勢(shì)。
　　 2.在正常對(duì)照組中,凋亡細(xì)胞培養(yǎng)上清中CD200濃度高于活細(xì)胞。SLE患者活細(xì)胞培養(yǎng)上清內(nèi)CD200濃度與血沉呈正相關(guān),SLE患者凋亡

5、細(xì)胞培養(yǎng)上清內(nèi)CD200濃度與C3、外周血WBC數(shù)量呈負(fù)相關(guān)。
　　 3.CD200無論對(duì)未成熟樹突狀細(xì)胞還是成熟樹突狀細(xì)胞的趨化過程均起著負(fù)性調(diào)節(jié)的作用。
　　 結(jié)論:本文通過研究CD200對(duì)吞噬過程的影響,得出結(jié)論:在凋亡過程中,不僅細(xì)胞表面CD200的表達(dá)上調(diào),其培養(yǎng)上清中CD200濃度亦有所升高。在凋亡吞噬過程中,游離型CD200作為“don't find me”信號(hào),負(fù)性趨化樹突狀細(xì)胞,細(xì)胞膜表面的CD200作