植酸酶高產(chǎn)菌株的篩選及酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響.pdf

1、植酸酶是一類催化植酸及植酸鹽分解成肌醇和無(wú)機(jī)磷酸鹽的磷酸酶。它可以減輕植酸的抗?fàn)I養(yǎng)作用，促進(jìn)動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，降低糞便中磷的含量，減輕環(huán)境污染，因此植酸酶的應(yīng)用具有重大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。植酸酶主要來(lái)源于微生物，但是微生物天然菌株產(chǎn)酶水平較低，加上天然植酸酶的某些性質(zhì)如熱穩(wěn)定性等不能完全滿足飼料加工業(yè)的要求，從而限制了植酸酶在生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用。提高植酸酶的產(chǎn)量和改善植酸酶的酶學(xué)性質(zhì)，已成為植酸酶研究的熱點(diǎn)。
　　 本研究通

2、過(guò)選育高產(chǎn)、耐熱植酸酶產(chǎn)生菌株，進(jìn)一步優(yōu)化其發(fā)酵工藝，提高植酸酶的產(chǎn)量、改善植酸酶的酶學(xué)性質(zhì)；通過(guò)評(píng)定高酶活、耐熱植酸酶在肉雞日糧中的實(shí)際應(yīng)用效果，旨在為植酸酶的工業(yè)化生產(chǎn)和推廣應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　 一、高酶活、耐熱植酸酶菌株的選育
　　 本實(shí)驗(yàn)利用植酸鈣選擇性培養(yǎng)基，通過(guò)紫外線誘變和亞硝基胍處理等方法，經(jīng)過(guò)初篩和搖瓶復(fù)篩，獲得一株能高產(chǎn)耐熱植酸酶的無(wú)花果曲霉(Aspergillusficuum)

3、N5。
　　 二、無(wú)花果曲霉N5植酸酶部分酶學(xué)性質(zhì)研究
　　 無(wú)花果曲霉N5植酸酶的最適溫度為50℃，最適pH為2.5和5.0，75℃保溫處理5min后殘余酶活為77.7％。
　　 三、無(wú)花果曲霉N5固體發(fā)酵產(chǎn)植酸酶的工藝優(yōu)化
　　 無(wú)花果曲霉N5固體發(fā)酵產(chǎn)植酸酶的最佳培養(yǎng)基組成：麩皮94.94％、葡萄糖2％、氯化銨3％、氯化鈣0.01％、硫酸鎂0.05％、硫酸亞鐵0.001％、硫酸錳0.001％；最佳培

4、養(yǎng)條件：培養(yǎng)基水分含量65％、初始培養(yǎng)基pH4.0，30℃，培養(yǎng)72h。經(jīng)優(yōu)化后的植酸酶產(chǎn)生水平為16.84U/g干曲。
　　 四、無(wú)花果曲霉N5植酸酶飼養(yǎng)效果評(píng)定
　　 本試驗(yàn)研究了日糧中添加植酸酶對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能、骨礦質(zhì)化、消化代謝等方面的影響，探討了肉仔雞日糧中植酸酶的應(yīng)用效果和作用機(jī)理。
　　 試驗(yàn)選用1日齡的艾維茵肉仔雞800羽，公母分開飼養(yǎng)，各400羽。公、母肉仔雞各自隨機(jī)分成五組，每組設(shè)四個(gè)重復(fù)，每

5、個(gè)重復(fù)20羽。以玉米-豆粕型日糧為基礎(chǔ)糧，試驗(yàn)分別設(shè)：正常磷組-Ⅰ組(1-21日齡，0.42％有效磷，0U/kg植酸酶；22-42日齡，0.36％有效磷，0U/kg植酸酶)、加酶Ⅱ組(1-21日齡，0.33％有效磷，0U/kg植酸酶；22-42日齡，0.28％有效磷，0U/kg植酸酶)、加酶Ⅲ組(1-21日齡，0.33％有效磷，250U/kg植酸酶；22-42日齡，0.28％有效磷，250U/kg植酸酶)、加酶Ⅳ組(1-21日齡，0.3

6、3％有效磷，500U/kg植酸酶；22-42日齡，0.28％有效磷，500U/kg植酸酶)、加酶Ⅴ組(1-21日齡，0.33％有效磷，750U/kg植酸酶；22-42日齡，0.28％有效磷，750U/kg植酸酶)。整個(gè)試驗(yàn)期共計(jì)42天，試驗(yàn)結(jié)束前一周以Cr203為外源指示劑進(jìn)行消化試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)束后，每組選取4羽肉雞進(jìn)行屠宰，剖檢與取樣分析。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.植酸酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響
　　 公雞加酶Ⅱ組平均增

7、重較正常磷組降低4.08％(P＞0.05)，加酶Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分別提高3.57％(P＞0.05)、8.16％(P＜0.05)和9.89％(P＜0.05)；加酶Ⅱ組料重比較正常磷組提高4.52％(P＞0.05)，加酶Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分別降低5.08％(P＞0.05)、8.47％(P＜0.05)和7.68％(P＜0.05)。母雞加酶Ⅱ組和Ⅲ組平均增重較正常磷組分別降低7.03％(P＞0.05)和0.54％(P＞0.05

8、)，加酶Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分別提高0.62％(P＞0.05)和5.50％(P＜0.05)；加酶Ⅱ組料重比較正常磷組提高4.28％(P＜0.05)，加酶Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分別降低3.21％(P＞0.05)、3.74％(P＜0.05)和7.53％(P＜0.05)。
　　 2.植酸酶對(duì)肉雞脛骨發(fā)育的影響
　　 (1)公雞加酶Ⅱ組和Ⅲ組脛骨干重較正常磷組分別降低13.53％(P＜0.05)和2.41％(P＞0.05)，

9、加酶Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分別提高7.29％(P＞0.05)和9.18％(P＜0.05)。母雞加酶Ⅱ組和Ⅲ組脛骨干重較正常磷組分別降低10.92％(P＜0.05)和4.06％(P＞0.05)，加酶Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分別提高1.60％(P＞0.05)和9.19％(P＜0.05)。
　　 (2)公雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組脛骨磷含量較正常磷組分別降低9.25％(P＜0.05)、8.55％(P＜0.05)、0.87％(P＞0.05)

10、和1.75％(P＞0.05)。母雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組脛骨磷含量較正常磷組分別降低6.15％(P＜0.05)、5.87％(P＜0.05)、5.29％(P＜0.05)和2.00％(P＞0.05)。
　　 (3)公雞加酶Ⅱ組脛骨鈣含量較正常磷組分別提高7.19％(P＞0.05)；加酶Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分別降低0.99％(P＞0.05)、2.07％(P＞0.05)和4.49％(P＞0.05)。母雞加酶Ⅱ組、Ⅳ組和Ⅴ組脛骨

11、鈣含量較正常磷組分別提高6.08％(P＜0.05)、0.23％(P＞0.05)和1.91％(P＞0.05)，加酶Ⅲ組較正常磷組降低4.35％(P＞0.05)。
　　 (4)公、母雞各組脛骨長(zhǎng)度均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 3.植酸酶對(duì)肉雞血清相關(guān)指標(biāo)的影響
　　 (1)公雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組血清堿性磷酸酶活性較正常磷組分別提高164.14％、92.75％、84.29％和35.65％(P＜0.05)

12、。母雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組血清堿性磷酸酶活性較正常磷組分別提高109.14％、86.75％、53.93％和44.44％(P＜0.05)。
　　 (2)公雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組血清羥脯氨酸含量較正常磷組分別提高41.08％(P＜0.05)、17.75％(P＜0.05)、12.17％(P＜0.05)和3.19％(P＞0.05)。母雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組血清羥脯氨酸含量較正常磷組分別提高28.85％(P＜0.05)、11.

13、00％(P＜0.05)和6.42％(P＞0.05)，加酶Ⅴ組較正常磷組降低0.72％(P＞0.05)。
　　 (3)公雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組血清磷含量較正常磷組分別降低10.66％(P＜0.05)、9.64％(P＜0.05)和8.12％(P＜0.05)，加酶Ⅴ組較正常磷組提高1.02％(P＞0.05)。母雞加酶Ⅱ組和Ⅲ組血清磷含量較正常磷組分別降低8.90％(P＜0.05)和2.09％(P＞0.05)，加酶Ⅳ組和Ⅴ組較正常磷組分

14、別提高9.95％和8.90％(P＞0.05)。
　　 (4)公雞和母雞加酶Ⅱ組血鈣水平均要顯著高于正常磷組(P＜0.05)，加酶Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組血清鈣含量與正常磷組差異均不顯著(P＞0.05)。
　　 4.植酸酶對(duì)肉雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的影響
　　 (1)公雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組粗蛋白表觀消化率較正常磷組分別提高0.70％(P＞0.05)、0.15％(P＞0.05)、0.80％(P＞0.05)和3.40％(P＜0

15、.05)。母雞加酶Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組粗蛋白表觀消化率較正常磷組分別提高0.45％(P＞0.05)、1.67％(P＞0.05)、3.92％(P＜0.05)和5.05％(P＜0.05)。
　　 (2)公雞加酶Ⅳ組粗脂肪表觀消化率較正常磷組提高2.97％(P＜0.05)；其它兩個(gè)加酶組與正常磷組均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。母雞各加酶組粗脂肪表觀消化率與正常磷組均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 (3)低有效磷日糧中添加

16、植酸酶可以提高肉雞對(duì)總磷的表觀消化率，降低糞便磷含量。
　　 (4)公雞加酶Ⅱ、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組鈣表觀消化率較正常磷組分別提高1.94％(P＞0.05)、16.79％(P＜0.05)、21.58％(P＜0.05)和15.95％(P＜0.05)。母雞加酶Ⅱ、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組鈣表觀消化率較正常磷組分別提高4.74％(P＞0.05)、9.03％(P＜0.05)、15.76％(P＜0.05)和2.77％(P＞0.05)。
　　

17、(5)公雞加酶Ⅱ、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組鋅表觀消化率較正常磷組分別提高0.92％(P＞0.05)、1.46％(P＞0.05)、16.94％(P＜0.05)和18.17％(P＜0.05)。母雞加酶Ⅱ、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組鋅表觀消化率較正常磷組分別提高0.76％(P＞0.05)、4.46％(P＞0.05)、14.63％(P＜0.05)和14.91％(P＜0.05)。
　　 (6)公雞加酶Ⅱ、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組銅表觀消化率較正常磷組分別降低3.5

18、1％(P＞0.05)、1.81％(P＞0.05)、5.10％(P＜0.05)和16.07％(P＜0.05)。母雞加酶Ⅱ銅表觀消化率較正常磷組提高0.25％(P＞0.05)，加酶Ⅲ組較正常磷組降低0.57％(P＞0.05)，加酶Ⅳ組較正常磷組提高1.72％(P＞0.05)，加酶Ⅴ組較正常磷組降低4.91％(P＜0.05)。
　　 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明：在有效磷缺乏的肉雞日糧中添加植酸酶，能夠改善肉雞生長(zhǎng)性能、骨骼發(fā)育和血清相關(guān)指標(biāo)，能