奶牛產(chǎn)后生殖激素及其受體的含量與胎衣不下發(fā)生的相關(guān)性.pdf

1、奶牛胎衣不下（RFM）對(duì)奶牛的生產(chǎn)性能和繁殖能力有嚴(yán)重危害，是臨床上常見(jiàn)產(chǎn)科疾病之一。引起該病的病因十分復(fù)雜，疾病發(fā)生的分子基礎(chǔ)尚不明確，目前仍沒(méi)有切實(shí)有效的方法預(yù)測(cè)該病的發(fā)生。因此，對(duì)胎衣不下病因的研究對(duì)于管控該病至關(guān)重要。產(chǎn)后胎衣正常分離和排出的過(guò)程復(fù)雜，涉及到母體和胎兒體內(nèi)多種激素及其受體水平的改變，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常都有可能導(dǎo)致RFM的發(fā)生。因此，對(duì)奶牛血液中的激素和相關(guān)因子進(jìn)行檢測(cè)，分析與胎衣不下發(fā)生的相關(guān)性，有可能發(fā)現(xiàn)預(yù)測(cè)

2、該病發(fā)生的關(guān)鍵因素。本試驗(yàn)對(duì)分娩后奶牛血漿中激素的含量進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)胎兒胎盤(pán)中激素受體的表達(dá)量進(jìn)行了檢測(cè)，分析奶牛胎衣不下與激素含量及其受體表達(dá)的相關(guān)性，探討奶牛胎衣不下的發(fā)生機(jī)制。選取RFM組和胎衣正常脫落(NRFM)組奶牛各10頭，試驗(yàn)?zāi)膛７置浜罅⒓催M(jìn)行尾靜脈采血。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血漿中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、雌激素(E2)、催產(chǎn)素(OT)和前列腺素F2α(PGF2α)的含量。采集RFM組和NRFM組奶牛胎兒

3、胎盤(pán)組織，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(RT-qPCR)檢測(cè)胎盤(pán)組織中血管緊張素1型和2型受體(AT1-R和AT2-R)、雌激素受體α(ERα)、催產(chǎn)素受體(OTR)、前列腺素F2α受體(FP)基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平的差異。為進(jìn)一步在蛋白水平對(duì)AT1-R和ERα基因表達(dá)量進(jìn)行分析，通過(guò)蛋白免疫印跡技術(shù)(Western blotting)對(duì)胎盤(pán)組織中AT1-R和ERα蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，RFM組血漿中AngⅡ和OT的含量極顯著

4、低于NRFM組(P＜0.01)，E2的含量顯著低于NRFM組(P＜0.05)，而PGF2α的含量差異不顯著(P＞0.05)。AT1-R、AT2-R、ERα、OTR和FP基因mRNA在胎兒胎盤(pán)均有表達(dá)，其中RFM組AT1-R、AT2-R和ERαmRNA表達(dá)量極顯著低于NRFM組(P＜0.01)，OTR和FP基因mRNA表達(dá)量差異不顯著(P＞0.05)。RFM組胎兒胎盤(pán)中AT1-R和ERα蛋白表達(dá)極顯著低于NRFM組(P＜0.01)，這與m

5、RNA的表達(dá)水平上基本一致。由此可見(jiàn)，奶牛血漿中激素含量及胎兒胎盤(pán)中激素受體的表達(dá)量與RFM的發(fā)生密切相關(guān)，因此可以通過(guò)檢測(cè)血漿中AngⅡ、E2和OT的含量變化來(lái)預(yù)測(cè)RFM的發(fā)生。從NRFM組胎兒胎盤(pán)中AT1-R、AT2-R和ERα基因表達(dá)的高度表達(dá)可以推測(cè)，AngⅡ和E2通過(guò)與其特異性受體結(jié)合，發(fā)揮節(jié)律性地收縮血管、增加MMPs的表達(dá)和活性、誘導(dǎo)細(xì)胞質(zhì)Ca2+濃度升高等作用，有利于胎盤(pán)排出。但OTR和FP的表達(dá)及作用機(jī)理對(duì)奶牛RFM的