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文檔簡介
1、目的:研究NgR特異性siRNA體內干擾及NT-3基因體內轉染對大鼠脊髓損傷修復的作用。
方法:選用由中南大學實驗動物部提供的SD大鼠108只,體重200-250g,雌雄不限。隨機平均分為假手術組(n=27)、手術對照組(n=27)、NgR-siRNA組(n=27)和NgR-siRNA+NT-3組(n=27)。每組按照手術后12h、1d、2d、3d、5d、7d、14d、21d和28d9個時間點再平均分為9個小組,每小組3只。在
2、T8椎板水平,用做好標記的顯微剪刀剪斷脊髓的背側2/3,制作大鼠半橫斷損傷模型,用微量注射器自損傷處頭尾兩端緩慢注入細胞濃度1×106/ml相應細胞懸液10μl,5min內注射完畢留針5min,并用醫(yī)用生物膠封閉針孔防止細胞懸液順針道溢出。利用BBB評分評價大鼠運動功能恢復情況;相應時間點獲取損傷段脊髓標本,利用QPCR、Wb測定NT-3、NgR、GAP-43基因表達的變化,綜合評價RNA干擾沉默NgR基因及聯(lián)合NT-3基因轉染對大鼠脊
3、髓損傷后修復的影響。所得數(shù)據采用均數(shù)和標準差進行一般描述;各組之間的比較采用方差分析,進行兩兩比較。
結果:1、脊髓損傷術后7d、14d、21d、28d NgR-siRNA+NT-3組BBB評分明顯高于NgR-siRNA組、損傷對照組,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。2、QPCR結果顯示:NgR-siRNA+NT-3組NT-3、GAP-43基因表達水平升高更明顯,有統(tǒng)計學差異(P<0.05); NgR-siRNA+NT-3組Ng
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