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1、目的:1、檢測(cè)RASSFlA(RAS相關(guān)區(qū)域家族1A)在卵巢癌組織及腹腔沖洗液中的表達(dá)缺失情況,進(jìn)一步探討該基因表達(dá)缺失與卵巢癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。 2、通過檢測(cè)卵巢癌組織及腹腔沖洗液中RASSFlA基因甲基化狀態(tài)及程度,進(jìn)一步探討該基因在腫瘤組織中表達(dá)缺失的機(jī)制,以及該基因在卵巢癌診斷和判斷預(yù)后中的價(jià)值。 方法:1、采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT一PCR)的方法檢測(cè)42例卵巢癌患者癌組織、腹腔沖洗液(或腹水)、¨例正常卵
2、巢和19例良性卵巢病變組織中RASSFlAmRNA的表達(dá)。 2、通過甲基化特異性PCR(MSP)方法檢測(cè)RASSFlA啟動(dòng)子區(qū)5’CpG島在卵巢癌組織、腹腔沖洗液(或腹水)、正常卵巢組織及良性病變卵巢中的甲基化狀態(tài)及程度。結(jié)果:1、RASSFlAmRNA在所有正常和良性卵巢病變組織中均表達(dá),而在卵巢癌癌組織中存在較高的表達(dá)缺失率(57.1%)。 2、RASSFlAmRNA的表達(dá)缺失率與卵巢癌的手術(shù)一病理分期有關(guān),III~
3、Ⅳ期卵巢癌組織中RASSFlAmRNA的表達(dá)缺失率(75.0%)顯著高于I~I(xiàn)I(33.3%)(/KO.05),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性者癌組織中RASSFlAmRNA表達(dá)缺失率(73.9%)明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性者(36.8%)(P<0.0D。 3、腹腔沖洗液(或腹水)細(xì)胞學(xué)陽性者,其RASSFlAmRNA的表達(dá)缺失率(74.1%),顯著高于腹腔沖洗液(或腹水)細(xì)胞學(xué)陰性者,其RASSFlAmRNA的表達(dá)缺失率(26.7%)。
4、4、42例卵巢癌組織標(biāo)本中16例檢測(cè)到RASSFlA甲基化(38.1%),而所有正常卵巢組織及良性病變卵巢組織RASSFlA基因啟動(dòng)子區(qū)5’CpO島無甲基化,其差異具有顯著性(P<0.05)。 5、RASSFlA基因甲基化的發(fā)生率與卵巢癌的手術(shù)一病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性。臨床I期和II期RASSFlA基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的發(fā)生率為16.6%,III期和Ⅳ期RASSFlA基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的發(fā)生率為54.2%(P<0.05),
5、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性者RASSFlA基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的發(fā)生率為52.2%,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性者RASSFlA基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的發(fā)生率為15.3%(P<0.01)。 6、腹水細(xì)胞學(xué)陽性者RASSFlA基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的發(fā)生率為62.9%,腹水細(xì)胞學(xué)陰性RASSFlA基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的發(fā)生率為26.7%(P<0.05)。 結(jié)論:1、卵巢癌組織中RASSFlA基因表達(dá)明顯缺失,并與腫瘤的分化程度和轉(zhuǎn)移具有明顯的相關(guān)性,提示RAS
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