電刺激改善慢性低O2高CO2大鼠骨骼肌功能障礙.pdf

1、目的:
　　建立慢性大鼠低氧高二氧化碳模型，大鼠予以電刺激，觀察電刺激能否改善慢性低氧高二氧化碳模型大鼠骨骼肌障礙，探索電刺激是否通過影響miRNAs相關(guān)通路表達產(chǎn)生保護作用。
　　方法:
　　將24只雄性SD大鼠用隨機數(shù)字表法分成對照組（NC組）、低氧高二氧化碳組(HH組)、低氧高二氧化碳+電刺激組(HE組)，每組各8只。建立慢性低氧高二氧化碳大鼠模型，除NC外其余兩組置于低氧高二氧化碳艙中（維持艙內(nèi)O2濃度為9％～

2、11％，CO2濃度為5％～6％），每天8小時，每周7天，持續(xù)4周;其余時間同對照組飼養(yǎng)于正常環(huán)境中。動物實驗跑臺檢測大鼠耐力運動能力，免疫組化觀察骨骼肌橫截面積及肌纖維表型，實時熒光定量PCR檢測miR-1、miR-133a、miR-133b，Western blot檢測骨骼肌組蛋白脫乙?；?(histone deacetylase4，HDAC4)、血清應(yīng)答因子(serum response factor，SRF)、肌球蛋白重鏈Ⅱ a

3、(myosin heavy chainⅡ a，MHCⅡa)、肌球蛋白重鏈Ⅱb(myosin heavy chainⅡb，MHCⅡb)。
　　結(jié)果:
　　(1)動物實驗跑臺顯示，與對NC相比，HH組大鼠耐力運動能力明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;與HH組相比，HE組大鼠耐力運動能力明顯改善，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(2)免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)HH組骨骼肌肌纖維橫截面積較NC組明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意

4、義（P＜0.05）;與HH組相比，HE組骨骼肌肌纖維橫截面積明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;與NC組比較，HE組骨骼肌肌纖維橫截面積減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(3)免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)HH組慢肌纖維比例較NC組明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與HH組相比，HE組慢肌纖維比例明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與NC組相比，HE組慢肌纖維比例仍偏低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。<

5、br>　　(4)實時熒光定量PCR顯示HH組較NC組骨骼肌miR-1表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;與HH組相比，HE組骨骼肌miR-1表達量明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;與NC組相比，HE組骨骼肌miR-1表達量仍明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(5)實時熒光定量PCR顯示HH組較NC組骨骼肌miR-133a表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;與HH組相比，HE組骨骼肌

6、miR-133a表達量明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(6)實時熒光定量PCR顯示骨骼肌miR-133b表達在各組之間均無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　(7)Western blot顯示HH組較NC組骨骼肌HDAC4總蛋白表達量明顯減少，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）;HE組較HH組HDAC4總蛋白表達量有下降趨勢，但不具有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　(8)Western blot顯示HH組較NC組骨骼肌核內(nèi)HDAC4蛋白

7、表達量有明顯下降趨勢（P=0.058）;HE組較HH組核內(nèi)HDAC4蛋白表達量有上升趨勢，但不具有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　(9)Western blot顯示HH組較NC組骨骼肌SRF蛋白表達量明顯減少，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）;HE組較HH組SRF蛋白表達量有明顯增多，具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　(10)Western blot顯示HH組較NC組骨骼肌MHCⅡ a表達量明顯減少，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）;HE

8、組較HH組MHCⅡ a表達量有明顯增多，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。
　　(11)Western blot顯示HH組較NC組骨骼肌MHCⅡb表達量明顯增多，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）;HE組較HH組MHCⅡ a表達量有明顯減少，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　(1)慢性低氧高二氧化碳可以引起實驗大鼠的骨骼肌功能障礙。
　　(2)電刺激可以改善慢性低氧高二氧化碳模型大鼠的骨骼肌功能障礙。<