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1、本試驗(yàn)以經(jīng)過選育的一株獼猴桃酒酵母為供試菌種,麥芽汁為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,利用JMP、Box-Behnken響應(yīng)曲面和正交等試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,通過研究確定了酵母增殖培養(yǎng)基,優(yōu)化了增殖培養(yǎng)條件和胞內(nèi)海藻糖積累條件,確定了凍干保護(hù)劑配方,最后研制了符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的高活性獼猴桃干酵母,旨在為獼猴桃酒的工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)。研究結(jié)果表明: 1.增殖培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件JMP試驗(yàn)結(jié)果表明:在試驗(yàn)所選的13個(gè)影響因素中,葡萄糖、(NH<,4>)<,2>HP
2、O<,4>、MgSO<,4>、維生素B<,1>、維生素B<,2>、泛酸、溫度、初始pH、裝液量、轉(zhuǎn)速和時(shí)間等對(duì)酵母增殖均有極顯著的影響,F(xiàn)eSO<,4>和生物素對(duì)酵母增殖無影響。 2.通過增殖培養(yǎng)基Box-Behnken響應(yīng)曲面試驗(yàn)優(yōu)化的酵母細(xì)胞增殖培養(yǎng)基為葡萄糖8.39g/L,(NH<,4>)<,2>HPO<,4>0.53g/L,MgSO<,4>0.07g/L,維生素B<,1> 1.75mg/L,維生素B<,2>0.60mg/
3、L和泛酸0.57ml/L,生物量的預(yù)測(cè)值可達(dá)到3.01785×10<'8>。 3.通過增殖培養(yǎng)條件Box-Behnken響應(yīng)曲面試驗(yàn)優(yōu)化的酵母細(xì)胞增殖培養(yǎng)條件為溫度28.5℃、初始pH4.5、轉(zhuǎn)速175r/min、裝液量65mL和時(shí)間30h,生物量的預(yù)測(cè)值可達(dá)3.06352×10<'8>。 4.供試酵母在最佳培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的生長(zhǎng)曲線表明:0h~10h為酵母生長(zhǎng)延遲期,10h~22h為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,22h后轉(zhuǎn)入穩(wěn)定期。
4、 5.胞內(nèi)海藻糖積累條件L<,9>(3<'4>)正交試驗(yàn)結(jié)果表明:溫度、時(shí)間、pH和轉(zhuǎn)速四個(gè)因素對(duì)海藻糖積累的影響主次為溫度>時(shí)間>pH>轉(zhuǎn)速,優(yōu)化后的條件組合為溫度37℃,pH5,時(shí)間5h和轉(zhuǎn)速50r/min。 6.以無菌生理鹽水為凍干懸浮液,研究了蔗糖、海藻糖、脫脂乳粉和抗壞血酸四種保護(hù)劑的保護(hù)效果。JMP試驗(yàn)結(jié)果表明:四種保護(hù)劑對(duì)酵母凍干都有顯著的保護(hù)作用。 7.通過保護(hù)劑配方Box-Behnken響應(yīng)曲面試驗(yàn)
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