TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化模型的建立及FR167653對(duì)博萊霉素誘導(dǎo)肺纖維化的影響.pdf

1、目的建立轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforminggrowthfactor-beta1，TGF-β1)誘導(dǎo)肺切片纖維化模型。觀(guān)察FR167653對(duì)博萊霉素(bleomycin，BLM)誘導(dǎo)SD大鼠肺纖維化的作用及部分機(jī)制。 方法1.TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化模型的建立：在肺切片存活的基礎(chǔ)上，并從時(shí)效和量效兩個(gè)方面確定TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化的條件。以肺組織羥脯氨酸(hydroxyproline，HYP)含量來(lái)觀(guān)察氫化可的松

2、對(duì)模型的作用。 2.采用BLM誘導(dǎo)大鼠肺纖維化模型來(lái)觀(guān)察FR167653的療效，并測(cè)定大鼠血清中腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor-a，TNF-a)和白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)水平研究FR167653對(duì)肺纖維化作用的部分機(jī)制。 結(jié)果1.TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化模型的建立(1)肺切片培養(yǎng)：肺切片上清乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)水平先升后降

3、。MTT值在培養(yǎng)的9天內(nèi)均維持在較穩(wěn)定的水平，其波動(dòng)范圍在28.4％。并隨著3-硝基丙酸濃度的增加而降低，其IC50為1.72×10-5mol/l。 (2)TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化的合適時(shí)間點(diǎn)：與對(duì)照組對(duì)比，TGF-β1組的HYP值在第7天時(shí)顯著升高，第9天時(shí)更為明顯。 (3)TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化的起始劑量：在肺切片培養(yǎng)的第7天，與對(duì)照組對(duì)比，TGF-β1(2.5μg/l)組的HYP值顯著升高，其他組的HYP

4、值無(wú)明顯變化。 (4)HE染色顯示，TGF-β1(2.5μg/l，×7d)組可見(jiàn)肺纖維化的不均勻分布和炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)。Masson染色顯示大量膠原沉積。 (5)氫化可的松(0.1mg/l)對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化的影響：在TGF-β1誘導(dǎo)肺切片纖維化基礎(chǔ)上，未加氫化可的松與加入0.1mg/l氫化可的松組的HYP值無(wú)明顯差異。 2.FR167353對(duì)BLM誘導(dǎo)大鼠肺纖維化的抑制作用及部分機(jī)制(1)FR1676

5、53對(duì)BLM誘導(dǎo)大鼠肺纖維化的抑制作用：與假手術(shù)組相比，模型組體重明顯下降，肺系數(shù)和肺組織HYP含量顯著增加。病理組織學(xué)檢查也顯示，模型組大鼠肺組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、肺泡間隔增厚并有大量膠原沉積。FR167653(12、36mg/kg)組對(duì)上述肺纖維化指標(biāo)均有明顯改善作用。 (2)FR167353對(duì)BLM誘導(dǎo)大鼠肺纖維化抑制作用的部分機(jī)制：與假手術(shù)組相比，模型組TNF-a和IL-1β水平顯著增加。FR167653(12、36mg/k